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細胞凍存相關實驗操作詳解2021/12/27
一、怎樣凍存動物細胞?一個實驗室得到一個新的細胞株后，首先要把該細胞株培養(yǎng)擴增后凍存起來。細胞凍存首先可以在由于污染等情況丟失細胞時有備份可用，另外幾乎所有細胞在培養(yǎng)傳代的過程中發(fā)生一定程度的變異，為...
CaCl2 法制備感受態(tài)細胞2021/12/24
材料與儀器【器材】1．培養(yǎng)皿2．恒溫培養(yǎng)箱【試劑】1．LB培養(yǎng)基2．選擇性LB瓊脂培養(yǎng)平板（含氨芐青霉素，終濃度為50μg/ml）3．氨芐青霉素100mg/ml4．宿主細菌：經(jīng)100mmol/LCaC...
牙簽法小量制備質(zhì)粒DNA實驗2021/12/24
原理用牙簽從瓊脂培養(yǎng)基上挑取的菌落可直接用于制備質(zhì)粒DNA。所得的閉合環(huán)狀DNA往往雜質(zhì)太多，不能作為大多數(shù)限制酶的底物。材料與儀器抗生素溴酚藍溶液EDTA溴化乙錠NSS溶液KCl瓊脂糖凝膠LB、YT...
制備YAC DNA進行Southern印跡分析2021/12/24
材料與儀器酵母菌AHCSCESCEMTris·ClEDTATE乙酸甲RNaseA異丙醇NaCl培養(yǎng)箱離心管轉子步驟1.接種一個紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20mlAHC培養(yǎng)基的250ml三角燒瓶...
YAC 克隆的分析實驗 實驗庫 參考來源：2021/12/24
材料與儀器酵母菌AHCYPD甘油培養(yǎng)箱冷凍管步驟1.用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上，倒扣平板于30℃培養(yǎng)，直至長出1~3mm大小的紅色菌落為止。2.短期保存：用P...
熒光原位雜交技術2021/12/24
原理用已知的標記單鏈核酸為探針，按照堿基互補的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列，因而可以探針直接與染色體進行...
細胞傳代培養(yǎng)實驗常見問題詳解2021/12/23
01一般拿到細胞后，應該注意什么?收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十七）2021/12/23
細胞培養(yǎng)問題集錦第十七期，小編會繼續(xù)收集相關問題，每期都為大家更新5個細胞培養(yǎng)中遇到的問題并解答~81、▲問：hepg2細胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒有吹開的細胞？是不是念珠菌感染？出不來形...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十六）2021/12/23
細胞培養(yǎng)第十六期來了，今后也會陸續(xù)為大家更新，一起來看看吧~76、▲問：這是酵母菌感染嗎？一般會通過什么途徑污染？答：是酵母菌污染，像圈起來的連體結構就是。一般是環(huán)境和操作等途徑污染。問：用新潔爾滅擦...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十五）2021/12/23
本次更新第十五期細胞培養(yǎng)常遇問題集錦，大家一起來看看有沒自己培養(yǎng)細胞時遇到的問題吧~71、問：凍存細胞放在4°最多可以放多久呀？如不小心忘記了大概放4°放了3個小時還可以用嗎？答：問題不大，有復蘇過這...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十四）2021/12/23
本期我們繼續(xù)更新細胞培養(yǎng)常遇問題，看下有沒大家遇到的，讓我們細胞培養(yǎng)做得更好，個個細胞都養(yǎng)得“肥肥白白”~話不多說，以下為大家奉上本期精華~66、問：thp-1誘導貼壁之后，背景比較臟，還隱約看到有東...
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬及其特點詳解剖析2021/12/22
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬的概念最早于2007年提出，是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導酵母發(fā)生針對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的選擇性的自噬現(xiàn)象，其主要作用是降解多余的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜，控制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的體積從而維持細胞穩(wěn)態(tài)。近年來隨著對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬的研究方法、形成機...
腫瘤免疫治療靶點及相關小分子抑制劑/激動劑詳解2021/12/22
腫瘤相關的免疫治療主要包括細胞療法、免疫檢查點抑制劑及腫瘤疫苗三大類。免疫檢查點抑制劑（ICIs）主要是單克隆抗體（mAbs），而抗體類藥物大多存在不能口服、組織滯留時間延長、不能透膜等多種缺陷。因此...
如何快速測量細胞劃痕寬度？2021/12/22
細胞劃痕實驗可謂是性價比高的一個小實驗了。可以在不額外購買實驗設備的情況下，一定程度地評價腫瘤細胞或者成纖維細胞的遷移能力。在課題組經(jīng)費的限制下，這個實驗成為很多老板的*。細胞劃痕實驗本身的操作很簡單...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十三）2021/12/22
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦系列，由于之前小編都在收集一些大家實驗室中常遇到的問題并解答，現(xiàn)在和大家分享下最新的一期，希望這些真實案例可以真切的幫助到童鞋們在細胞實驗中少走彎路和解決問題，話不多說，以下上“正...
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