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基因敲除的原理與方法詳解2022/2/15
一.概述：基因敲除是自80年代末以來發(fā)展起來的一種新型分子生物學(xué)技術(shù)，是通過一定的途徑使機(jī)體特定的基因失活或缺失的技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應(yīng)用DNA同源重組原理，用設(shè)計的同源片段替代靶基因片段...
在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，出現(xiàn)支原體污染怎么辦？2022/2/15
細(xì)胞培養(yǎng)被支原體污染是極普遍的問題，面對支原體污染給細(xì)胞培養(yǎng)帶來的巨大難題，世界各國開始重視，并相繼建立了細(xì)胞庫，對細(xì)胞質(zhì)量進(jìn)展控制，效果明顯，支原體污染的問題得以限制。目前已知能污染細(xì)胞的支原體有2...
如何進(jìn)行蛋白樣品的制備？要注意些什么？2022/2/15
蛋白樣品的制備是蛋白質(zhì)組研究的第一步，無論后續(xù)采用怎樣的分離或鑒定手段，樣品制備都是關(guān)鍵步驟。因此，為了*分析所有的細(xì)胞內(nèi)蛋白，組織與細(xì)胞必須進(jìn)行有效的破碎。本文在此介紹幾種較為常見的方法。變性條件—...
細(xì)胞自噬的相關(guān)研究，有這篇就足夠了！2022/2/15
自噬（autophagy）被認(rèn)為是維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵過程，也是對等壓力源的反應(yīng)，如營養(yǎng)缺乏，這可能會危及細(xì)胞的生存。當(dāng)細(xì)胞接觸到這些壓力源時，原本在低水平發(fā)生以平衡生物分子的恒定合成的自噬，就會被大幅...
Western Blot 實(shí)驗(yàn)常見問題解析匯總2022/2/15
1簡述WesternBlot（簡稱WB），蛋白質(zhì)免疫印跡法，是基于蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳分離和特異性抗體識別蛋白的特性，通過顯色技術(shù)，以達(dá)到檢測目的蛋白的技術(shù)。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于定性檢測蛋白水平的表...
細(xì)胞凍存，讓細(xì)胞重活過來！2022/1/15
雖然目前組織和器官的冷凍保存極其困難，但是隨著生命科學(xué)的進(jìn)步，細(xì)胞凍存技術(shù)已經(jīng)成為了細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存...
細(xì)胞培養(yǎng)遇到問題？怎么解決？2022/1/15
培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，時常會遇到各種的問題，怎么辦？以下是整理的一些常用問題的解決辦法。培養(yǎng)液pH值變化太快可能原因：(1)CO2張力不對。(2)培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。(3)NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。(...
認(rèn)識什么是單核細(xì)胞？2022/1/15
什么是單核細(xì)胞單核細(xì)胞（monocytes）是血液中最大的血細(xì)胞，也是體積最大的白細(xì)胞，在白細(xì)胞的占比為3-8%，是機(jī)體防御系統(tǒng)的一個重要組成部分。單核細(xì)胞來源于骨髓中的造血干細(xì)胞，并在骨髓中發(fā)育，當(dāng)...
為什么要使用原代細(xì)胞？2022/1/15
細(xì)胞體外培養(yǎng)很好地補(bǔ)充了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的不足，它讓細(xì)胞功能和進(jìn)程的研究更具可操作性。十幾年來，細(xì)胞系已在科學(xué)發(fā)展中起了重要作用，然而僅僅由細(xì)胞系得來的數(shù)據(jù)越來越難有說服力。細(xì)胞系誤認(rèn)和細(xì)胞不純等因素鞭策研究...
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)方法技巧2022/1/15
SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞簡單介紹：骨髓原始間充質(zhì)干細(xì)胞(SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞)是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，是人們在哺乳動物的骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細(xì)胞的多種分化潛能的細(xì)胞...
實(shí)驗(yàn)室試劑如何科學(xué)管理？2022/1/10
一、實(shí)驗(yàn)室試劑管理普遍存在的問題1．無試劑專庫。試劑儲藏室與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備在同一房間內(nèi)，致使室內(nèi)空氣的相對濕度過大，試劑易變質(zhì)失效。2.保管環(huán)境不良。缺乏良好的通風(fēng)設(shè)備，既影響試劑的質(zhì)量，也影響工作人員的身...
流式細(xì)胞術(shù)的空白對照、同型對照、FMO對照要怎么選？2022/1/10
流式數(shù)據(jù)分析時，應(yīng)該把門設(shè)在哪里合適呢，特別是那些分群不明顯的結(jié)果。我們知道流式細(xì)胞術(shù)常見的有空白對照（未染色細(xì)胞）、同型對照和FMO對照，每種對照適用于什么情況呢？1、空白對照：空白對照的作用是作為...
培養(yǎng)基的顏色改變代表著什么？2022/1/10
我們剛剛購買回來的培養(yǎng)基是鮮紅色的，為什么不是綠色、藍(lán)色的呢？培養(yǎng)基的顏色主要來自酚紅，酚紅指示顏色非常靈敏，pH值范圍為6-8，顏色由黃變?yōu)樽霞t。為了培養(yǎng)方便，能讓我們直觀地感覺培養(yǎng)液的狀況，加入酚...
siRNA和shRNA有什么區(qū)別？2022/1/10
shRNA即短發(fā)卡RNA（shorthairpinRNA），包含一段緊密發(fā)卡環(huán)結(jié)構(gòu)，常被用于RNA干擾沉默靶基因的表達(dá)。siRNA是小干擾RNA，是一種雙鏈RNA，3’端含有兩個突出的非配對堿基。si...
細(xì)胞誘導(dǎo)與檢測方法2022/1/10
使用細(xì)胞細(xì)胞包被液包被細(xì)胞培養(yǎng)板，將傳代或復(fù)蘇凍存的人間充質(zhì)干細(xì)胞接種到6孔板上，密度為2×105-3×105cells/cm2或2×105-3×105cells/孔，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培...
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