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Mirus TransIT-VirusGEN系列轉染試劑

具體成交價以合同協議為準

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北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡稱西美杰)于2006年成立,由留美歸國生物領域專業(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅持自己的經營理念,勤奮踏實地整合全球產品資源與技術資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產企業(yè)提供一站式產品服務方案,幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時間、節(jié)約科研成本、提升科研水平、增強企業(yè)市場競爭力。

      西美杰以其開放、進取、誠信、專業(yè)等優(yōu)勢與國外多家試劑、原料和技術供應商建立了長期穩(wěn)定的合作伙伴關系,成為了眾多國際廠商的中國區(qū)總代理、一級代理和中國授權代表處。更與藥用輔料生產商長期戰(zhàn)略性合作,共同開展制藥輔料的進口注冊與市場開拓。

      業(yè)務的迅猛發(fā)展促進了西美杰內部組織架構的不斷優(yōu)化,針對科研客戶與企業(yè)客戶的不同需求,西美杰建立了科研與工業(yè)兩支獨立的營銷團隊,分別配備專業(yè)的技術支持和客服人員,力求為不同類型的客戶提供前沿專業(yè)的解決方案以及產品與高效的服務。

      經過十多年的發(fā)展,西美杰得到了眾多客戶的支持與信賴,在業(yè)務上實現了迅猛發(fā)展,以專業(yè)的服務成為多家跨國企業(yè)中國區(qū)研發(fā)與生產基地、制藥企業(yè)與診斷企業(yè)以及中科院系統、軍科院系統、醫(yī)科院系統、清華大學、北京大學、北大醫(yī)學部、首都醫(yī)科大學等高校與科研院所采購平臺的供貨商。

一、西美杰主營產品線與代理品牌

1. 免疫學:二抗和底物生產商KPL的中國代理;抗體生產商Lifespan,Abnova,Cali-Bio,Mybiosource等近10個品牌的中國一級代理。

2. 分子與細胞生物學:德國生化試劑Panreac-AppliChem、德國核苷酸原料品牌Jena Bioscience等中國總代理;氧化應激檢測Cell Biolabs、轉染試劑專家 Mirus、動物免注射給藥工具Alzet等中國總代理或一級代理。

3. 植物學:美國組培試劑品牌Phytotech中國總代理;植物抗體生產商Agrisera、組培抗菌劑產品PPM供應商PCT中國一級代理。

4. 蛋白結構學:特色蛋白結晶試劑與耗材Jena Bioscience、Hampton、Anatrace、MiTeGen。

5. 生物制藥:覆蓋制藥從上游到下游環(huán)節(jié),全球藥用輔料供應商Pfanstiehl(全球重磅生物藥中7個藥物的輔料供應商)、細胞營養(yǎng)添加物KERRY、歐洲制藥生化原料供應商Panreac-AppliChem,以及HCP/Prot A/BSA殘留檢測試劑盒生產商Cygnus等中國制藥領域代理。

6. 診斷原料:二抗和底物生產商KPL以及自身免疫抗原抗體生產商Arotec中國總代理。

二、西美杰主營產品領域與服務

1. 科研/研發(fā)產品及服務項目
研究領域上:覆蓋生物化學、細胞生物學、免疫學、蛋白組學、植物學、分子生物學、藥物篩選;
研究對象上:覆蓋人類、動物與模式動物、植物等物種;
產品結構上:從基因到蛋白質結構與in vivo/in vitro功能的分析和研究;
產品種類上:從試劑到特殊工具和耗材。

2. 生物工業(yè)生產原料、藥用輔料
覆蓋培養(yǎng)基生產、生物制藥/疫苗生產細胞營養(yǎng)、無抗生素篩選原核表達系統、HCP/Prot A/BSA殘留檢測試劑盒、檢測抗原/抗體/底物/BSA、診斷工業(yè)原料。

3. 技術服務、合約開發(fā)與技術轉讓
穩(wěn)定表達CHO細胞株的構建與工藝開發(fā);
培養(yǎng)基優(yōu)化;
多肽合成、抗體定制、病毒包裝等;
藥物功能篩選服務KinaseProfiler™等。

4. 代理進口服務
西美杰擁有自主進出口資質,和自有國際物流運輸系統,為中國眾多大型科研機構提供免稅科研儀器和試劑的代理進口服務,我們樂意為客戶代理進口在中國沒有銷售代理的產品。

西美杰將繼續(xù)秉承誠信、專業(yè)經營之風,整合全球優(yōu)勢產品資源、技術資源和我公司的服務資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產企業(yè)提供一站式的服務。

生化試劑,抗體,試劑盒,耗材,培養(yǎng)基,植物生長調節(jié)劑,凝膠

供貨周期 現貨 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥

病毒載體技術的進步提高了基因和細胞治療的安全性和有效性,全球已有多種基因和細胞治療藥物被監(jiān)管機構批準上市。目前大多數基因/細胞治療方法都是利用病毒載體來實現的,其中常用的兩種病毒載體——腺相關病毒(AAV)載體常被用于基因治療,而慢病毒(LV)載體則常被用于基因修飾細胞治療。病毒載體通常是2-4質粒共轉入HEK293細胞生產出的,而轉染試劑是病毒載體生產的關鍵要素之一,對轉染效率和功能效價有顯著影響。第一代非病毒轉染方法依靠簡單的線性聚合物,如聚乙烯亞胺(PEI)或脂質體將DNA轉入到細胞內,但其性能并不能*病毒載體的大規(guī)模生產需求。雖然人工合成轉染試劑在過去30年里取得了巨大的進步,但仍然難以逾越大自然在數十億年進化出的依靠病毒傳遞基因的效率。因此,優(yōu)化非病毒轉染性能的最佳方法是盡可能模仿病毒轉運DNA的自然機制的試劑。


TransIT-VirusGEN系列轉染試劑


西美杰代理的Mirus轉染試劑就是利用自然基因傳遞機制作為其化合物庫的設計靈感從中篩選適合病毒生產的混合配方,將轉染試劑與核酸的靜電相互作用、細胞吸附與內吞、釋放、基因表達效率降低細胞毒性幾乎所有影響轉染成功率的因素全部考慮在內。通過不懈的努力,Mirus開發(fā)出了一種全新的仿生轉染技術——TransIT-VirusGEN系列轉染試劑,它不僅僅是基于PEI或脂質體,而是采用多組分脂質聚合物納米復合物(LPNC),能夠高效地結合和包裹DNA,將其帶入懸浮或貼壁的HEK293細胞中,然后將其從細胞核內釋放,以便同時滿足2-4個不同的質粒的表達,這種全新的轉染試劑比單獨使用PEI及其衍生聚合物或脂質體的轉染效率和完整病毒生產效率都有顯著提高。同時,Mirus還研發(fā)出了一種*合成的(無動物源)轉染增強劑(Enhancer),與TransIT-VirusGEN轉染試劑搭配使用時,可以進一步提高病毒滴度。另外,為了滿足病毒載體從研發(fā)到大規(guī)模生產不同階段的需求,Mirus分別推出了R&D、SELECTGMP三種級別的TransIT-VirusGEN轉染系列產品,以適應不同階段病毒載體的生產規(guī)模、效率以及法規(guī)要求。

實驗表明,Mirus基于LPNC的轉染試劑可以在不同的細胞培養(yǎng)平臺(貼壁和懸?。?/span>、生物反應器和培養(yǎng)基類型中提高病毒產量和功能性病毒滴度。與業(yè)內其他金標準相比,在使用增強劑的情況下,病毒滴度至少可提高2-4。而在加入增強劑之后,在合適的培養(yǎng)條件下,病毒產量甚至能夠提高10倍以上!(結果見下圖1-5

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1. 基于脂質聚合物納米復合物(LPNC)和聚乙烯亞胺(PEI配方的轉染試劑用于腺相關病毒(AAV)和慢病毒(LV)載體生產的性能對比。分別用基于LNPCTransIT-VirusGEN試劑(不含增強劑與含增強劑)、25kda PEI和基于PEI技術的競爭品牌A3轉染試劑產生AAV(左)和LV(右)。以LPNC為基礎的TransIT-VirusGEN轉染試劑比以PEI為基礎的轉染試劑的病毒顆粒表達量高3-5倍。當TransIT-VirusGEN和增強劑同時使用時,比單獨使用TransIT-VirusGEN大約提升了一倍。轉染試劑 : DNA的比值體積 質量。

 

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2. TransIT-VirusGEN轉染試劑在不同細胞培養(yǎng)基中的表現。使用Thermo Fisher Scientific公司的病毒生產細胞進行轉染,該細胞適應四種不同的培養(yǎng)基配方,分別來自Thermo Fisher公司的LV-MAX培養(yǎng)基、Expi293表達培養(yǎng)基、FreeStyle F17表達培養(yǎng)基和來自Irvine Scientific公司的BalanCD HEK293培養(yǎng)基。后一種培養(yǎng)基的AAV總效價較高,但在所有使用的培養(yǎng)基中,無論是否添加增強劑,TransIT-VirusGEN轉染試劑均表現優(yōu)異。DNA與轉染試劑配比為2μg DNA 3μl轉染試劑,轉染細胞密度為2.0×106/ml生產LV也獲得了類似的結果(數據未顯示)。

 

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3. 分別在四種不同的轉染條件和兩個不同的收獲時間,測定TransIT-VirusGEN轉染試劑和PEI為基礎的轉染試劑A3物理滴度和功能滴度。利用Expi293F細胞生產AAV2-GFP。轉染48小時和72小時后收獲的病毒分別測定功能滴度TU/mL(左)和物理滴度GC/mL(右)。結果顯示用TransIT-VirusGEN轉染試劑和增強劑轉染收獲病毒效價最高。此外,TransIT-VirusGEN轉染試劑PEI為基礎的轉染試劑的表達更快。這些結果表明,對于病毒滴度的評估,功能滴度可能是一個更可靠的指標。因此,建議測試幾個不同的收獲時間點確定最佳方案。

 

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4. 每種培養(yǎng)體系都應優(yōu)化轉染細胞融合度和接種密度。用DMSO+10%胎牛血清培養(yǎng)貼壁的HEK293t/17細胞生產慢病毒g DNA/mL。試劑盒包括TransIT-VirusGEN轉染試劑、VirusGEN LV復合物形成溶液和VirusGEN LV增強劑。

 

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5. Expi293表達培養(yǎng)基中培養(yǎng)Expi293F細胞,使用VirusGEN AAV轉染試劑盒,內含TransIT-VirusGEN轉染試劑、VirusGEN AAV復合物形成溶液和VirusGEN AAV增強劑,在懸浮細胞培養(yǎng)中生產AAV。分別用2:1(左)和3:1(右)兩種比例來確定理想的轉染試劑和DNA配比(體積:質量)。每種轉染體系都應對轉染試劑: DNA配比及每毫升細胞所需的總DNA量進行優(yōu)化。

 

TransIT-VirusGEN系列轉染產品信息


圖片1.png


TransIT-VirusGEN系列轉染試劑



mirus-logo.png

美國Mirus公司成立于1995年,是世界上很早開發(fā)高效、低毒轉染試劑的公司之一,同時也是目前該類試劑主要的供應商之一。Mirus許多杰出成果獲得廣大用戶的好評。

北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區(qū)代理,始終秉承著專業(yè)、嚴謹的態(tài)度為客戶提供優(yōu)質的產品與服務。如果您對上述產品感興趣,歡迎聯系北京西美杰解更多產品信息或申請試用。北京西美杰是Mirus代理,Mirus中國代理,Mirus北京代理,Mirus總代理,Mirus上海代理,,Mirus西北代理,Mirus西南代理,Mirus東北代理,Mirus華北代理,Mirus華南代理,Mirus華中代理,負責Mirus在中國的相關業(yè)務。

 

引用文獻:

Addressing Critical Issues in Cell & Gene Therapy, Snow, J.




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