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人乳鐵傳遞蛋白試劑盒

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更新時間:2025-03-18 09:14:52瀏覽次數(shù):461次

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人乳鐵傳遞蛋白試劑盒借 ELISA 雙抗體夾心法,定量測樣本中乳鐵傳遞蛋白。經(jīng)規(guī)范采樣、加樣等操作,靈敏度高、特異性強,用于營養(yǎng)學(xué)、免疫學(xué)研究及臨床診斷。

人乳鐵傳遞蛋白試劑盒介紹
人乳鐵傳遞蛋白試劑盒是用于體外定量檢測人血清、血漿、乳汁及其他生物液體中乳鐵傳遞蛋白含量的重要工具,在營養(yǎng)學(xué)、免疫學(xué)以及臨床診斷等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
檢測原理
該試劑盒多采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù),以雙抗體夾心法為例。試劑盒內(nèi)的微孔板預(yù)先包被有針對人乳鐵傳遞蛋白的特異性抗體。當(dāng)加入待測樣本時,樣本中的乳鐵傳遞蛋白會與包被抗體特異性結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的抗人乳鐵傳遞蛋白抗體,該抗體與已結(jié)合在包被抗體上的乳鐵傳遞蛋白進(jìn)一步結(jié)合,形成 “包被抗體 - 乳鐵傳遞蛋白 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。加入底物溶液后,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顯色反應(yīng),顏色的深淺與樣本中乳鐵傳遞蛋白的含量成正比。通過酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度(OD 值),依據(jù)預(yù)先繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可準(zhǔn)確計算出樣本中乳鐵傳遞蛋白的含量。
使用方法
  1. 樣本采集:根據(jù)檢測需求,采集適量人血清、血漿、乳汁等樣本。血清樣本需待血液自然凝固后離心獲?。谎獫{樣本則需在采血時加入合適抗凝劑后離心分離;乳汁樣本采集后需適當(dāng)處理,如離心去除脂肪顆粒等雜質(zhì)。采集后的樣本應(yīng)妥善保存,避免反復(fù)凍融影響檢測結(jié)果。

  1. 試劑盒準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,在室溫(20℃ - 25℃)平衡 30 分鐘,使試劑盒內(nèi)各試劑溫度均勻。同時準(zhǔn)備好移液器、吸頭、酶標(biāo)儀等實驗器材,并確保其性能正常。

  1. 加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本及空白對照按規(guī)定體積準(zhǔn)確加入微孔板相應(yīng)孔中,輕輕振蕩混勻,使樣本與包被抗體充分接觸,然后在設(shè)定溫度下孵育一定時間。

  1. 洗板:孵育結(jié)束后,棄去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,以徹di清除未結(jié)合的物質(zhì),減少非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干,防止殘留液體影響后續(xù)反應(yīng)。

  1. 加酶標(biāo)抗體:向各孔加入適量酶標(biāo)抗體,振蕩混勻后再次孵育。

  1. 顯色與終止:加入底物顯色液,在避光條件下孵育,待顏色變化至合適程度時,加入終止液終止反應(yīng),使反應(yīng)停止在優(yōu)良檢測狀態(tài)。

  1. 結(jié)果測定:立即使用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長下測定各孔 OD 值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本中乳鐵傳遞蛋白的含量。

性能特點
  1. 高靈敏度:能夠檢測到極低濃度的乳鐵傳遞蛋白,滿足對微量樣本或低表達(dá)水平的檢測需求。例如,可精準(zhǔn)檢測到皮克級別的乳鐵傳遞蛋白含量變化。

  1. 特異性強:試劑盒中的抗體對人乳鐵傳遞蛋白具有高度特異性,與其他類似物質(zhì)交叉反應(yīng)極小,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。在復(fù)雜的生物樣本中,能準(zhǔn)確識別并測定乳鐵傳遞蛋白。

  1. 重復(fù)性好:同一批樣本多次檢測結(jié)果穩(wěn)定,變異系數(shù)小,為科研及臨床診斷提供可靠且可重復(fù)的數(shù)據(jù)支持。多次重復(fù)檢測同一批樣本,結(jié)果偏差極小。

應(yīng)用場景
  1. 營養(yǎng)學(xué)研究:用于評估人體鐵營養(yǎng)狀況,研究乳鐵傳遞蛋白在鐵吸收、轉(zhuǎn)運過程中的作用機制。

  1. 免疫學(xué)研究:探究乳鐵傳遞蛋白在免疫調(diào)節(jié)中的功能,以及其與免疫相關(guān)疾病的關(guān)聯(lián)。

  1. 臨床診斷:輔助診斷一些疾病,如感染性疾病、炎癥性疾病等,通過檢測乳鐵傳遞蛋白含量的變化,為醫(yī)生提供診斷依據(jù)。在新生兒感染性疾病的診斷中,該試劑盒也具有重要價值,可幫助醫(yī)生及時發(fā)現(xiàn)病情。

 

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