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當前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>生化試劑>>淀粉系列>> BM6020淀粉磷酸化酶試劑盒 淀粉系列-常備現(xiàn)貨

淀粉磷酸化酶試劑盒 淀粉系列-常備現(xiàn)貨

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號BM6020

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地北京市

更新時間:2025-04-25 09:29:21瀏覽次數(shù):52次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號 BM6020 應用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 淀粉磷酸化酶試劑盒
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程wei一的可逆反應酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
淀粉磷酸化酶試劑盒 淀粉系列-常備現(xiàn)貨


淀粉磷酸化酶(Starch phosphorylase,SP試劑盒說明書

微量法 100 /96 

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP是淀粉代謝過程wei一的可逆反應酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。

在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負責延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負責葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。

在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數(shù)量級,一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。

測定原理:

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原 NADP+產(chǎn)生NADPH,使 340nm 下吸光值增加。

淀粉磷酸化酶試劑盒  淀粉系列-常備現(xiàn)貨

組成:

產(chǎn)品名稱

BM6020-100T/96S

Storage

提取液:液體

100ml

4

試劑一:液體

20ml

4

試劑二:粉劑

1

4

試劑三:粉劑

1

4

說明書

一份

 

試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 1.5ml 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存;試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存;臨用前加入 1.5ml 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存。

 

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準


自備儀器和用品:

酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前理:

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml) 15~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液)進行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃,離心 10min,取上清待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(ml 500~10001 的比例(建議 500 萬細胞加 1ml 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min;然后 10000g 4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。

測定步驟:

1、酶標儀預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm;

2、工作液的配制:臨用前按照樣本量將試劑一、試劑二、試劑三按照 170μl:10μl:10μl 的比例混合,臨用前配制,半小時內(nèi)使用。

3、在 96 孔板中加入 10μl 樣本和 190μl 工作液,立即混勻,記錄 340nm  1min 時的吸光值A1  6min時的吸光值A2,計算ΔA=A2-A1

SP 活力單位的計算:

(1) 按樣本蛋白濃度計算

單位定義:每mg 組織蛋白每分鐘產(chǎn)生 1nmol NADPH 定義為一個酶活力單位。

SPnmol/min/mg prot=[ΔA×V 反總÷ε×d×109]÷(V ×Cpr) ÷T

=1286×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計算

單位定義:每g 組織每分鐘產(chǎn)生 1nmol NADPH 定義為一個酶活力單位。

SPnmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷ε×d×109]÷(W ×V ÷V 樣總)÷T

=1286×ΔA÷W

(3) 按樣本細胞計算

單位定義:每萬個細胞每分鐘產(chǎn)生 1nmol NADPH 定義為一個酶活力單位。

SPnmol/min/104 cell=[ΔA×V 反總÷ε×d×109]÷(細胞數(shù)量 ×V ÷V 樣總)÷T

=2.572×ΔA÷W

V 反總:反應體系總體積,2×10-4 L;εNADPH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d96 孔板光徑, 0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 ml;V 樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣本質(zhì)量,g;細胞數(shù)量,500 萬。

淀粉磷酸化酶試劑盒  淀粉系列-常備現(xiàn)貨


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