諾博萊德植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 氮素

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2153

產(chǎn)品名稱：植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

自備試劑：該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

中文名稱：植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Plant Ureides Content Assay Kit

規(guī)格：100T/48S

檢測(cè)方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chǔ)存條件：Store at -20℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC2153植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

4、標(biāo)準(zhǔn)品:10mg尿囊su。臨用前加入632.5μL蒸餾水配制成100μmol/mL酰脲標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明:

選育高固氮活性豆科植物品種是提高豆科植物固氮能力的一個(gè)有效途徑。大豆根瘤菌固氮的最初輸出產(chǎn)物主要是酰脲(尿囊su和尿囊酸)。酰脲是大豆一根瘤菌共生固氮中的氮代謝產(chǎn)物，是氮素貯藏和運(yùn)輸?shù)闹饕问?，在大豆氮代謝中起著重要作用?？赏ㄟ^測(cè)定豆科植物組織中酰脲的含量，從而評(píng)估其固氮能力。

尿囊su在過酸或堿條件下水解產(chǎn)生乙醛酸，然后在苯肼和強(qiáng)酸條件下可被氧化，生成紅色絡(luò)合物，在535nm處有特殊吸收峰，據(jù)此可由吸光值計(jì)算出樣本中酰脲的含量。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、鼓風(fēng)烘箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、30~50目篩、冰和蒸餾水、無水乙醇(>98%，AR)、濃鹽酸(37%，AR)和EP管。

操作步驟

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量）

植物樣本：將供試的植物樣本在65℃的鼓風(fēng)烘箱中烘干，研磨成粉狀，過30~50目篩。按質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1:10~20比例(建議稱取0.1g烘干樣本，依次加入1.0mL提取液A與1.0mL提取液B，禁止將提取液 A與提取液B混勻待用)，漩渦混勻，在80℃水浴鍋中萃取5min，然后3500rpm，室溫，離心15min，棄沉淀，取上清液置于冰上待測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至535nm，蒸餾水調(diào)零。

2、將試劑六與試劑七置于冰水浴中預(yù)冷30min以上，并置于冰上待用。

3、標(biāo)準(zhǔn)液的處理:將標(biāo)準(zhǔn)品配制成100μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液后，用蒸餾水稀釋至25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125 nmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。(備注：注意不要在此步驟直接檢測(cè)吸光值)

注意:對(duì)照管不進(jìn)行水浴加熱處理;尿囊酸測(cè)定管只需進(jìn)行第二次的沸水浴;測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管及空白管在沸

水浴加熱時(shí)，EP管蓋緊并用封口膜密封，避免液體蒸發(fā)影響試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

三、植物中酰脲含量計(jì)算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸，其對(duì)應(yīng)的△A標(biāo)準(zhǔn)為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y-kx+b，將△A尿囊酸和△A酰脲分別帶入方程得到x:(nmol/mL)和x>(nmol/mL)。

2、豆科植物中酰脲含量的計(jì)算:

尿囊酸含量(nmolg質(zhì)量)=x?xV提取+W=2xx?÷WJFE SCIE

酰脲含量(nmol/g質(zhì)量)=x2xV 提取÷W=2xx2+W

V提取:加入提取液體積，2mL:W:樣本質(zhì)量，g。

植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 氮素

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

BC2153植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit 100T/48S