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深圳市安培生物科技有限公司
中級會(huì)員 | 第5年

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人生長激素的放射免疫分析法

時(shí)間:2021/12/16閱讀:1354
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材料與儀器

hGH表達(dá)質(zhì)粒
洗滌液 親和素包被珠
試管 γ計(jì)數(shù)儀

步驟


1.  取轉(zhuǎn)染了hGH表達(dá)質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液100~500 μl。

2.  加100 μl 培養(yǎng)液或標(biāo)準(zhǔn)品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-標(biāo)記的抗體溶液,混合。加入1顆親和素包被珠,蓋上試管蓋或用Parafilm膜封口,室溫下在一水平旋轉(zhuǎn)器上以約170 r/min 搖動(dòng)下溫育90 min。

3.  加2 ml 冼滌液洗磁珠兩次。*吸干洗滌液。
 
圖一、人生長激素表達(dá)載體
圖一、人生長激素表達(dá)載體
 
4.  將試管置于γ計(jì)數(shù)儀上計(jì)數(shù)1 min。
 
5.  用試劑盒中的hGH標(biāo)準(zhǔn)品測得的數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。用這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線來計(jì)算未知樣品的hGH含量。


同實(shí)驗(yàn)其他方法

CAT活性的層析分析法

1.  100 mm 培養(yǎng)皿中的轉(zhuǎn)染了CAT表達(dá)質(zhì)粒的貼壁細(xì)胞,用PBS洗兩次,每次5 ml每培養(yǎng)皿加入1 ml TEN溶液。將細(xì)胞置于冰浴5 min。   2.  用橡膠

原位裂解細(xì)胞的CAT分析法

1.  60 mm 培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染了CAT表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞,用2 ml PBS洗1次。每培養(yǎng)皿加入2 ml 低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。 2.  吸去低滲緩沖液,加入400 μl T

CAT活性的相-抽提分析法

一、來源于哺乳動(dòng)物細(xì)胞 1.  按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法,制備哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制細(xì)胞方法來收集細(xì)胞,則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2

以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


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