Toxin代北京試劑 toxin代天津試劑toxin代上海試劑toxin代廣東試劑toxin代南京試劑toxin代湖北試劑toxin代湖南試劑 toxin代黑龍江試劑 toxin代吉林試劑 toxin代浙江試劑 toxin代江蘇試劑 toxin代江西試劑toxin代寧夏試劑toxin代河北試劑toxin代河南試劑toxin代山西試劑toxin代陜西試劑toxin代重慶試劑Toxin代安徽試劑

北京華新康信年度推廣活動(dòng) TOXIN 上海試劑 TOXIN 湖北試劑 TOXIN 10280血漿對照 TOXIN 10280血漿對照

TOXIN 活動(dòng)價(jià)TOXIN 活動(dòng)價(jià)TOXIN 活動(dòng)價(jià) TOXIN 所有系列一站式采購 TOXIN 檢測試劑盒 TOXIN 檢測試劑盒 TOXIN 放線菌類 TOXIN 放線菌類胰蛋白 TOXIN 江蘇試劑 TOXIN 湖南試劑 TOXIN 所有系列一站式采購TOXIN 天津試劑 TOXIN 所有系列一站式采購 TOXIN 天津試劑 TOXIN 天津試劑 TOXIN 上海試劑 TOXIN 上海試劑 TOXIN 廣東試劑 TOXIN 廣東試劑 Toxin代浙江試劑 Toxin代浙江試劑 Toxin代安徽試劑 Toxin代安徽試劑

三型副雞禽桿菌對SPF雞的致病力試驗(yàn)方法

1．1．2 培養(yǎng)基 半合成培養(yǎng)基、雞血清雞肉湯和雞

血清雞肉湯瓊脂。參照馮文達(dá)等［9］的方法制備。

1．1．3 試驗(yàn)用雞 120只35日齡 SPF 雞?購自北

京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心?在北京所負(fù)壓隔離器內(nèi)飼養(yǎng)至57

日齡。

1．2 方法

1．2．1 細(xì)菌培養(yǎng) 取凍干卵黃?用普通肉湯稀釋

后?接種雞血清雞肉湯瓊脂?于體積分?jǐn)?shù)為5％ CO2

在37℃培養(yǎng)24h～48h?挑取典型菌落接種雞血清

雞肉湯?在37℃培養(yǎng)10h～12h（B 型）和18 h～

24h（A 型和 C 型）?分裝保存于－80 ℃冰柜的同

時(shí)?進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)和純粹性檢驗(yàn)［10］。

1．2．2 試驗(yàn)分組 將120只試驗(yàn)用雞隨機(jī)分成3

組?A 型菌組40只雞?B 型菌組35只雞?C 型菌組

45只雞（表1）。

1．2．3 攻毒 從－80℃取出純粹性檢驗(yàn)合格活菌

計(jì)數(shù)過的 A、B、C 型菌液?按照保存前計(jì)數(shù)的活菌數(shù)

用半合成培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋?每個(gè)劑量注射5只雞?每

只雞眶下竇內(nèi)注射0．2mL。所含 cfu／0．2mL 如表

1。攻毒后24h 開始逐只檢查每只雞的發(fā)病情況?

每天檢查1次?共檢查7d［10］。

1．2．4 細(xì)菌分離 在攻毒后96h?攻毒劑量最小組

（1．5×104 cfu／0．2mL）各隨機(jī)取2只雞?進(jìn)行細(xì)菌

分離［6-8］?粗提 DNA?進(jìn)行 PCR［9?11-12］。

2 結(jié)果

2．1 細(xì)菌培養(yǎng)和活菌計(jì)數(shù)

B 型副雞禽桿菌 BJ-05株在雞血清雞肉湯培養(yǎng)

基 中培養(yǎng)10h 后?菌液渾濁?計(jì)數(shù)結(jié)果為10×

108cfu／mL；A 型副雞禽桿菌 C-Hpg8（CVCC254）在

雞血清雞肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h 后?可見細(xì)菌明顯

生長?計(jì)數(shù)結(jié)果為0．2×108cfu／mL；668株在雞血清

雞肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)20h 后?菌液較渾濁?計(jì)數(shù)結(jié)

果為4×108cfu／mL。純檢結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)有其他細(xì)

菌生長。

2．2 攻毒雞只發(fā)病情況

攻毒后24h～168h?每天逐只檢查雞只的發(fā)病

情況。攻毒后24h?3大組雞只大部分發(fā)病?表現(xiàn)為

眶下竇腫脹?流鼻汁、有少數(shù)雞只面部水腫。攻毒后

48h?除 A 型3．0×104cfu／0．2mL 組和 B 型100×

104cfu／0．2mL 組各有1只雞沒有發(fā)病外?其余118

只雞均發(fā)病?且大部分雞只呈現(xiàn)明顯的雞傳染性鼻

炎臨床癥狀?眶下竇明顯腫脹?鼻孔周圍黏附飼料?

面部水腫明顯?公雞肉垂水腫。攻毒后72 h?A 型

3．0×104cfu／0．2mL 組的5只雞全部發(fā)病?其余基

本與攻毒后48h 相同。攻毒后第4天至第5天?發(fā)

病雞數(shù)和臨床癥狀與攻毒后72h 相同。至第6天?

部分發(fā)病雞只臨床癥狀減輕至消失?攻毒后第7天?

除少數(shù)雞只外?大部分雞只臨床癥狀消失。攻毒后

24h～72h 的詳細(xì)發(fā)病情況見表2。表2中的“＃"

眶下竇腫脹明顯?面部水腫?鼻汁多?有的雞只眼睛

一過性失明?公雞肉垂水腫。“＋＋＋"表示眶下竇

腫脹較明顯?鼻汁較多；“＋＋"表示眶下竇腫脹?有

鼻汁；“＋"表示用手?jǐn)D壓時(shí)流出鼻汁。

2．3 細(xì)菌分離和 PCR 鑒定

從 A 型、B 型和 C 型各2只雞的眶下竇均分離

到純的副雞禽桿菌?將它們接種普通肉湯和普通瓊

脂?37℃培養(yǎng)96h?均未見細(xì)菌生長。用6個(gè)分離株

的粗提 DNA 進(jìn)行 PCR?結(jié)果6／6陽性?與標(biāo)準(zhǔn)陽性

對照大?。?span>0．5kb）一致（圖1）

toxin代  toxin代 toxin代  toxin北京試劑 toxin天津試劑   toxin上海試劑  toxin代廣東試劑 toxin 代南京試劑  toxin代湖北試劑 toxin代湖南試劑  toxin代黑龍江試劑  toxin代吉林試劑  toxin代上海試劑 toxin代廣州試劑  toxin系列全  toxin系列全  toxin系列全  toxin降價(jià) toxin其他試劑  toxin其他試劑  toxin降價(jià)  toxin降價(jià)  toxin降價(jià)  toxin活動(dòng)價(jià)  toxin活動(dòng)價(jià) toxin活動(dòng)價(jià) toxin活動(dòng)價(jià) toxin活動(dòng)價(jià) toxin活動(dòng)價(jià) toxin活動(dòng)價(jià) toxin活動(dòng)價(jià) toxin活動(dòng)價(jià) toxin降價(jià) toxin降價(jià) toxin降價(jià) toxin試劑  toxin試劑  toxin試劑  toxin試劑  toxin試劑  toxin試劑  toxin試劑  toxin試劑  toxin北京現(xiàn)貨  toxin天津現(xiàn)貨 toxin河北現(xiàn)貨  toxin河南現(xiàn)貨 toxin廣東現(xiàn)貨 toxin廣州現(xiàn)貨 toxin上?，F(xiàn)貨 toxin湖北現(xiàn)貨 toxin湖南現(xiàn)貨 toxin內(nèi)蒙古現(xiàn)貨 toxin山西現(xiàn)貨 toxin山東現(xiàn)貨，618周年慶， toxin降價(jià) toxin降價(jià) toxin降價(jià)，歡迎選購  toxin 湖北試劑  toxin 湖北試劑

以下TOXIN 系列，一直現(xiàn)貨，價(jià)格美麗，TOXIN 擁有很多忠實(shí)用戶 TOXIN 擁有很多忠實(shí)用戶 TOXIN 擁有很多忠實(shí)用戶 TOXIN 選購 TOXIN 選購 TOXIN 選購

TOXIN 現(xiàn)貨 大力回饋新老客戶，現(xiàn)貨打折出售，現(xiàn)有品牌和種類，新老客戶可以自由選購： TOXIN 北京試劑 TOXIN 常見問題與解答  TOXIN 上海試劑 TOXIN 試劑  TOXIN 廣東試劑 TOXIN 深圳試劑 TOXIN 河北試劑 TOXIN 上海試劑 TOXIN 上海試劑  TOXIN 安徽試劑  TOXIN 河南試劑 tissue.Transnetyx天津試劑 TOXIN 代理， TOXIN 上海試劑 TOXIN 廣東試劑TOXIN 廣州試劑TOXIN 深圳試劑TOXIN 內(nèi)蒙古試劑 TOXIN 河南試劑 TOXIN 江蘇試劑 TOXIN 江西試劑TOXIN 湖北試劑TOXIN 湖南試劑TOXIN 安徽試劑TOXIN 蘇州試劑 TOXIN 杭州試劑TOXIN 浙江試劑 TOXIN 北京   TOXIN 制劑存儲(chǔ)  TOXIN 江蘇試劑   TOXIN 浙江試劑    TOXIN 江蘇試劑   TOXIN 江蘇試劑  TOXIN 廣州試劑 TOXIN 試劑選購 TOXIN 試劑選購

toxin代北京試劑 toxin代天津試劑toxin代上海試劑toxin代廣東試劑toxin代南京試劑toxin代湖北試劑toxin代湖南試劑 toxin代黑龍江試劑  toxin代吉林試劑 toxin代浙江試劑 toxin代江蘇試劑 toxin代江西試劑toxin代寧夏試劑toxin代河北試劑toxin代河南試劑toxin代山西試劑toxin代陜西試劑toxin代重慶試劑toxin代安徽試劑to