李斯特菌鑒定試劑盒
HiListeria™ Identification Kit
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
KB012A | 李斯特菌鑒定試劑盒 HiListeria™ Identification Kit | 5KT 10KT 20K | 詢(xún)價(jià) |
概況
該試劑盒為標(biāo)準(zhǔn)化的顯色檢測(cè)系統(tǒng)，通過(guò)李斯特菌特異性的動(dòng)力學(xué)、糖發(fā)酵和生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。微生物的發(fā)酵反應(yīng)，引起培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。
使用說(shuō)明
待鑒定菌種應(yīng)先進(jìn)行分離和純化?？稍?/span>PALCAM瓊脂（貨號(hào):M1064）或胰蛋白?瓊脂（貨號(hào)：M538）（含血或不含血）上挑取一個(gè)菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯（貨號(hào)：M210）中，在35-37℃培養(yǎng)4-6小時(shí)， 直到在620nm處，接種液濁度≥1.0OD。
無(wú)菌打開(kāi)試劑盒，撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線。在35℃-37℃孵育24-48小時(shí)。
結(jié)果判定
依據(jù)結(jié)果詮釋表。在第2孔、第4孔和第5孔，在24-48小時(shí)孵育期結(jié)束后，分別添加如下試劑：
1）觸酶試驗(yàn)：第1孔
用接種環(huán)刮取第1孔內(nèi)表面，將接種環(huán)蘸到含3%H2O2的干凈小試管中。
接種環(huán)表面冒泡為陽(yáng)性。
接種環(huán)表面沒(méi)有冒泡為陰性。
注意：3%的H2O2需新鮮配置。
2）硝酸鹽還原試驗(yàn)：第2孔
加1-2滴對(duì)氨基苯磺酸（貨號(hào)：R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（貨號(hào)：R009）
立即出現(xiàn)粉紅色為陽(yáng)性
顏色無(wú)變化為陰性
3）七葉苷水解試驗(yàn)：第3孔
第3孔變?yōu)楹谏?，為?yáng)性反應(yīng)。
4）伏-普試驗(yàn)：第4孔
加3-4滴Barritt試劑A(貨號(hào)：R029)和1-2滴Barritt試劑B（貨號(hào)：R030）
10分鐘內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽(yáng)性
無(wú)顏色變化或有輕微變化為陰性。
5）甲基紅試驗(yàn)：第5孔
加1-2滴甲基紅試劑（貨號(hào)：I007）
試劑保持紅色為陽(yáng)性
試劑脫色變黃為陰性
6）糖發(fā)酵試驗(yàn)：第6孔-第12孔
酸產(chǎn)生導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色由紅變黃，為陽(yáng)性反應(yīng)。
如果仍保持紅色，則為陰性。
12種生化反應(yīng)
1 | 觸酶試驗(yàn) |
2 | 硝酸鹽還原試驗(yàn) |
3 | 七葉苷水解試驗(yàn) |
4 | 伏普試驗(yàn) |
5 | 甲基紅試驗(yàn) |
6 | 木糖發(fā)酵試驗(yàn) |
7 | 乳糖發(fā)酵試驗(yàn) |
8 | 葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn) |
9 | α-甲基-D-甘露糖苷 |
10 | 鼠李糖發(fā)酵試驗(yàn) |
11 | 蔗糖發(fā)酵試驗(yàn) |
12 | 甘露醇發(fā)酵試驗(yàn) |
鑒定的李斯特菌物種
格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）
單核細(xì)胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes）
英諾克李斯特菌（Listeria innocua）
斯氏李斯特氏菌（Listeria seeligeri）
伊氏李斯特氏菌伊氏亞種（Listeriaivannovii Sub sp. ivannovii）
伊氏李斯特菌倫敦亞種（Listeriaivannovii Sub sp. londoniesis）
威氏李斯特氏菌（Listeria welshimeri）
儲(chǔ)存條件及保質(zhì)期
2℃-8℃；12個(gè)月
引用文獻(xiàn)
A.K.Biswas, etal. Microbial profiles of frozen trimmings and silver sides prepared at Indianbuffalo meat packing plants. Meat Science. 2008,80(2): 418-422
AmirMasoud Shahbazi，et al. Comparativecontamination of Listeria monocytogenes in traditional dairy products inEsfahan Province, Iran. African Journal of Microbiology Research.2013, 7(16):1522-1526
NikiKharel,et al. Microbiological assessment of ethnic street foods of theHimalayas.Journal of Ethnic Foods.2016,3(3):235-241
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