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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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10301ES40Hieff® Quick T4 DNA Ligase （400 U/µL）
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 10301ES40 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：688更新時間：2022-02-09 15:29:22
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- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 40000 U（40 KU） |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10301ES40 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
本品主要適用于標(biāo)記RNA 3’-末端，環(huán)化RNA和DNA寡聚核苷酸以及克隆cDNA等核酸操作。
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號
規(guī)格
價格（元）
Hieff® Quick T4 DNA Ligase (400 U/µL)
10301ES40
40000 U (40 KU)
446.00
產(chǎn)品描述Hieff® Quick T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建庫過程中DNA片段和接頭連接的單酶產(chǎn)品，該產(chǎn)品已經(jīng)過高通量測序驗(yàn)證，質(zhì)量優(yōu)異。對于無需進(jìn)行體系調(diào)整的客戶，推薦選購Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）。
產(chǎn)品組分組分編號
組分名稱
規(guī)格
10301-A
Hieff® Quick T4 DNA Ligase (400 U/µL)
100 µL
10301-B
10 × T4 DNA Ligase Buffer
250 µL
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸，-20℃保存，有效期2年。
單位定義
在20 μL的連接反應(yīng)體系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ分解物在16℃下反應(yīng)30 min時，催化50%以上的DNA片段發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。
注意事項(xiàng)
1）Buffer在融解時，如果出現(xiàn)少量沉淀屬正?，F(xiàn)象，請顛倒混勻后使用。2）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3）本產(chǎn)品僅作科研用途！使用方法
1.目前主流的合并法DNA建庫試劑盒，其末端修復(fù)和加A處理后一般不純化，直接進(jìn)行接頭連接。本試劑盒可與主流的商業(yè)化末端修復(fù)加A體系兼容，進(jìn)行接頭連接。反應(yīng)體系請參考如下配制，渦旋瞬離后置于20℃，反應(yīng)15 min即可。
表1. Adapter Ligation體系
名稱
體積（μL）
dA-tailed DNA
60
10 × T4 DNA Ligase Buffer
10
50% PEG6000
10*
DNA Adapter
X**
Hieff® Quick T4 DNA Ligase
1-5***
ddH2O
To 100
【注】：*試劑盒內(nèi)未提供50% PEG6000，需自行準(zhǔn)備。
**接頭用量參考表2。
***Hieff® Quick T4 DNA Ligase用量可根據(jù)需要添加1-5 μL。
2. Adapter的質(zhì)量和使用濃度直接影響連接效率及文庫產(chǎn)量。Adapter用量過高可能會產(chǎn)生較多Adapter Dimer，用量較低可能會影響連接效率及文庫產(chǎn)量。表2列舉了使用本試劑盒，不同Input DNA量推薦的Adapter使用量。
表2. 500 pg-1 μg Input DNA推薦的Adapter使用濃度
Input DNA
Adapter : Input DNA摩爾比
Input DNA
Adapter : Input DNA摩爾比
1 μg
10:1
50 ng
100:1
500 ng
20:1
25 ng
200:1
250 ng
40:1
1 ng
200:1
100 ng
100:1
500 pg
400:1
【注】：Input DNA摩爾數(shù)（pmol）≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度（bp）]。
【接頭添加計(jì)算舉例】：當(dāng)Input DNA為100 ng，Input DNA長度為300 bp時，接頭應(yīng)該添加多少？
第一步，計(jì)算Input DNA摩爾數(shù)。公式：Input DNA摩爾數(shù)（pmol）≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度（bp）]；
Input DNA摩爾數(shù)（pmol）=100 ÷（0.66×300）=0.5 pmol；
第二步，計(jì)算接頭添加摩爾數(shù)。根據(jù)表2查詢接頭添加比例；
根據(jù)表2，查得Input DNA 100ng時接頭添加比例100:1，則接頭添加摩爾數(shù)=100×0.5 pmol=50 pmol；
第三步，計(jì)算接頭添加體積。接頭濃度=15 μmol/L（如使用其他接頭，濃度需要依據(jù)其他接頭濃度參數(shù)）；
接頭添加體積=接頭添加摩爾數(shù)（50 pmol）÷接頭濃度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）
綜上，接頭可添加3.4 μL。（注：接頭最大加入體積不超過5 μL）
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貨號
規(guī)格
價格（元）
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12615ES04/16
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12616ES04/16
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12618ES04/16
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