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深圳市科潤達生物工程有限公司
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放射免疫分析法

時間:2011/12/3閱讀:4135
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放射免疫分析法
IBL、DRG中國*代理商“深圳科潤達生物工程有限公司”竭誠為您服務(wù)

 
根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理,以放射性同位素標(biāo)記抗原或抗體,根據(jù)射線的多少定性或定量測定待檢標(biāo)本中抗體或抗原的量的一種檢測分析技術(shù).
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主要有兩種:RIA和IRMA
相同: 均為以抗原抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),測定對象為物質(zhì)的抗原;
不同:RIA為競爭性,標(biāo)記物為抗原
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  結(jié)合部分放射性與待測抗原濃度呈負相關(guān),在直角坐標(biāo)系呈曲線
  為了產(chǎn)生競爭,抗體僅使用結(jié)合50%抗原的量,故靈敏度較免放法低
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IRMA 非競爭性,標(biāo)記的是抗體,且為過量(高滴度)
結(jié)合部分放射性與待測抗原濃度呈正相關(guān),因抗體為過量,不存在競爭結(jié)合,故結(jié)合在固相物上的放射性計數(shù)與抗原濃度呈正比,在直角坐標(biāo)系近似直線
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1 RIA 放射免疫: 基于競爭法原理
標(biāo)記抗原(Ag*)和非標(biāo)記抗原(Ag)與*抗體(Ab)競爭性結(jié)合。隨著Ag增加,Ag*與Ab結(jié)合形成Ag*Ab復(fù)合物的放射量降低,二者變化成反比函數(shù)關(guān)系。                 
 

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 2  IRMA 免疫放射:非競爭性結(jié)合
2.1單位點抗原IRMA原理圖:
 
 先用過量標(biāo)記抗體與待測抗原進行反應(yīng),形成抗原抗體復(fù)合物;用固相抗原結(jié)合未結(jié)合標(biāo)記抗體并將其分離, 測定上清液的放射量
 
2.2雙位點抗原IRMA原理圖:
 
先用固相抗體與抗原結(jié)合,再用過量的標(biāo)記抗體與抗原的另一決定簇結(jié)合,形成固相抗體-抗原-標(biāo)記抗體復(fù)合物,洗棄剩余標(biāo)記抗體,測固相上放射量。
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德國IBL放免試劑盒 基本加樣步驟:
 ————————————————————————————
           試劑   (零標(biāo)準(zhǔn)品) S0   S1 ~S5   樣品   標(biāo)記抗體/標(biāo)記抗原
————————————————————————————
按說明書依次入試管內(nèi)
———————————————————————————
             孵育放置等
————————————————————————————
             洗滌液或分離劑 
————————————————————————————
              Υ-計數(shù)器讀數(shù)
————————————————————————————
結(jié)果計算:
  以N/T、B/T計算NSB、S0 結(jié)合百分率,以B/B0 計算標(biāo)準(zhǔn)及待測物結(jié)合百分率,
在半對數(shù)座標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并查出樣品值或由自動Υ-計數(shù)儀器直接讀出結(jié)果。
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中國*總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司
公司地址 :深圳市南山區(qū)蛇口沿山路10號6層。 :518067
:(8線)傳真 :+86 755 26814431
免費訂貨 :。
技術(shù)咨詢 :,;手機,;,kerunda@szonline.net 。
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歡迎索取詳細資料,在線:kerunda_tech
 

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