一、分類

假單胞菌屬歸于假單胞菌科，有200余種細(xì)菌，其DNA的G+C的摩爾分?jǐn)?shù)為58％～71％，主要包括銅綠假單胞菌（P.aeruginosa) ,熒光假單胞菌（P.fluorescens)、惡臭假單胞菌（P.putica)、斯氏假單胞菌（P.stutizeri)、產(chǎn)堿假單胞菌（P.alcaligenes）等。

二、生物學(xué)特性

假單胞菌屬為革蘭陰性桿菌，菌體直或微彎，無(wú)芽胞、無(wú)莢膜，有單鞭毛（銅綠假單胞菌、斯氏假單胞菌、產(chǎn)堿假單胞菌）或叢鞭毛（熒光假單胞菌、惡臭假單胞菌），運(yùn)動(dòng)活潑。

本屬細(xì)菌專性需氧，生長(zhǎng)溫度范圍廣，生長(zhǎng)溫度35℃（熒光假單胞菌25℃），少數(shù)細(xì)菌可在4℃（熒光假單胞菌）或42℃（銅綠假單胞菌、斯氏假單胞菌）生長(zhǎng)，可以此來(lái)鑒別細(xì)菌。細(xì)菌生長(zhǎng)的pH 5.0～9.0，pH值為7.0。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上均可生長(zhǎng)，可產(chǎn)生多種水溶性色素，主要有綠膿素（pyocyanin)和青膿素（pyoverdin)，青膿素在360 nm紫外光下可發(fā)出黃綠色熒光，故又稱熒光素。各種假單胞菌產(chǎn)生的色素見(jiàn)表17-2。細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中呈混濁生長(zhǎng)，常在其表面形成菌膜。在麥康凱平板上生長(zhǎng)良好，各種菌在血平板上形成不同的菌落特征，根據(jù)生長(zhǎng)特性可進(jìn)行初步鑒定。

銅綠假單胞菌在普通平板上形成的菌落扁平濕潤(rùn)、大小不一、邊緣不整齊、常呈融合狀生長(zhǎng)，所產(chǎn)生的綠膿素和熒光素使培養(yǎng)基被染成藍(lán)綠色或黃綠色，從臨床標(biāo)本中分離的菌株有80％～90％可產(chǎn)生綠膿素或熒光素。在血平板上生長(zhǎng)后有生姜樣氣味，形成扁平濕潤(rùn)、有金屬光澤的菌落，常呈β溶血。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，24 h可形成半透明菌落，48 h后菌落中心呈棕綠色。來(lái)自肺囊性纖維化患者的菌株常形成M型菌落。

熒光假單胞菌在血平板上30℃孵育24 h后形成灰白色、扁平稍隆起、濕潤(rùn)、光滑、邊緣整齊的菌落，無(wú)溶血，挑取菌落呈黏絲狀。

斯氏假單胞菌在血平板上24 h長(zhǎng)出1 mm大小菌落，大多數(shù)菌落干燥、有皺紋、粗糙、扁平，淡黃色或黃棕色，堅(jiān)韌而黏附平板；少數(shù)菌落光滑、濕潤(rùn)，大部分產(chǎn)生透明溶血環(huán)。多次轉(zhuǎn)種后光滑型菌落增多，呈遷徙生長(zhǎng)及擴(kuò)散。

在血平板上產(chǎn)堿假單胞菌和惡臭假單胞菌都形成光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊的灰色菌落，無(wú)溶血。

三、臨床意義

假單胞菌屬分布廣泛，土壤、水和空氣中均有存在，屬于條件致病菌。人感染主要來(lái)源于環(huán)境、污染的醫(yī)療器械、輸液或注射等，成為醫(yī)院感染的主要病原菌。在人類非發(fā)酵菌感染中，假單胞菌屬占70％～80％，主要為銅綠假單胞菌，其次為惡臭假單胞菌、熒光假單胞菌等。

銅綠假單胞菌不僅廣泛存在于環(huán)境中，也存在于正常人體的腸道、皮膚及外耳道，當(dāng)宿主正常的防御機(jī)制被改變或損傷時(shí)，如燒傷、留置導(dǎo)尿管、氣管切開(kāi)插管等，以及免疫機(jī)制缺損時(shí)，如患者等，可導(dǎo)致皮膚、呼吸道、泌尿道、眼部等感染。當(dāng)細(xì)菌毒力強(qiáng)、數(shù)量多而機(jī)體抵抗力降低時(shí)，細(xì)菌可在血中繁殖引起敗血癥、腦膜炎。

從傷口、痰、胸腔積液、尿或血液中可分離出熒光假單胞菌。由于熒光假單胞菌具有嗜冷性，可在血庫(kù)儲(chǔ)存的血中繁殖，若輸入含有此種細(xì)菌的庫(kù)存血液或血制品，可導(dǎo)致敗血癥、感染性休克或血管內(nèi)凝血等嚴(yán)重后果，其內(nèi)毒素的磷脂部分可導(dǎo)致輸血后不可逆的休克。

惡臭假單胞菌為魚(yú)的一種致病菌，常從的魚(yú)中檢出，也可作為人類咽部的正常菌群，是人類少見(jiàn)的條件致病菌，偶從少、類尿道感染、皮膚感染和骨髓炎標(biāo)本中分離出，分泌物有腥臭味。惡臭假單胞菌感染通常病情較重，因?yàn)樵摼匀芎筢尫懦鰞?nèi)毒素而致中毒癥狀。

斯氏假單胞菌在人類的呼吸道、泌尿道均可發(fā)現(xiàn)，為條件致病菌，可引起原發(fā)性或繼發(fā)性感染，如呼吸道感染、中耳炎、關(guān)節(jié)炎、尿路感染及敗血癥等。

產(chǎn)堿假單胞菌廣泛存在于多種水源中，是醫(yī)療用水污染的主要原因。產(chǎn)堿假單胞菌如污染新生兒溫箱濕化用水和氧氣濕化用水，極容易導(dǎo)致新生兒呼吸道感染甚至敗血癥等。產(chǎn)堿假單胞菌還可引起化膿性腦膜炎、尿道炎、肺炎等感染性疾病。

四、微生物學(xué)檢驗(yàn)

1、檢驗(yàn)程序非發(fā)酵菌檢驗(yàn)程序見(jiàn)圖17-1。

圖17-1非發(fā)酵菌檢驗(yàn)程序

2、標(biāo)本采集假單胞菌屬感染常見(jiàn)標(biāo)本有血液、腦脊液、胸腹水、膿液、分泌液、痰、尿液等。進(jìn)行醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)時(shí)，標(biāo)本主要為病區(qū)或手術(shù)室的空氣、水、地面、把手、醫(yī)療診斷器械及生活用品。

3、直接顯微鏡檢查取標(biāo)本直接涂片、革蘭染色，鏡下可見(jiàn)革蘭陰性桿菌，散在排列，無(wú)芽胞。

4、分離培養(yǎng)臨床感染標(biāo)本一般直接接種于血平板及麥康凱平板，血液、腦脊液標(biāo)本經(jīng)增菌后再轉(zhuǎn)種于血平板。

5、鑒定假單胞菌屬的主要特征：革蘭陰性桿菌，專性需氧，在血平板和麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，通常產(chǎn)生明顯的水溶性色素。氧化酶陽(yáng)性，葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)(O/F試驗(yàn)）為氧化型或產(chǎn)堿型，端生單或叢鞭毛，據(jù)此可與非發(fā)酵菌其他屬相區(qū)別。進(jìn)一步做系列生化試驗(yàn)進(jìn)行菌種鑒定。具體見(jiàn)表17-3。

表17-3臨床常見(jiàn)假單胞菌的鑒定特征

注：＋表示90％以上陽(yáng)性；一表示90％以上陰性；V表示不定。

在臨床微生物實(shí)驗(yàn)室，假單胞菌屬細(xì)菌的鑒定常采用商品化的試劑盒，以及全自動(dòng)或半自動(dòng)的細(xì)菌鑒定系統(tǒng)。

從臨床標(biāo)本中分離出銅綠假單胞菌，需要排除污染，從患者血液及無(wú)菌體液、尿液中分離到本菌，特別是反復(fù)檢出者，結(jié)合臨床表現(xiàn)即可確定為病原菌感染。需連續(xù)三次痰培養(yǎng)陽(yáng)性才能確立銅綠假單胞菌下呼吸道感染，如患者無(wú)感染的臨床表現(xiàn)，雖然分離到銅綠假單胞菌亦應(yīng)作為正常菌群。

6、藥物敏感試驗(yàn) 假單胞菌屬的細(xì)菌對(duì)有些抗生素天然耐藥，臨床治療假單胞菌感染的抗菌藥物主要有三類：β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類和喹諾酮類。按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所(CLSI）推薦，銅綠假單胞菌藥敏試驗(yàn)可選用Kirby-Bauer法。

北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對(duì)購(gòu)買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇?，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國(guó)內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長(zhǎng)期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！