用戶真實反饋：科研大咖的“真香”體驗

“CD3被敲低了80%多！你們這試劑的確有點東西！我做原代的，每次都得敲，以后我要長期回購！”

這條來自一線科研人的反饋，印證了ProteanFect CRISPRMax的硬核實力。無論是基因敲除、點突變還是大片段插入，這款試劑盒均能穩(wěn)定輸出高效結(jié)果。

今天，我們?yōu)槟鷰硪豢罡锩援a(chǎn)品——ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒。它憑借非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì)體的獨·特技術(shù)，輕松實現(xiàn)原代細胞80%以上的基因編輯效率，成為國內(nèi)外實驗室的“明星工具”！

產(chǎn)品核心優(yōu)勢：為何選擇ProteanFect CRISPRMax？

1. 專為原代與難轉(zhuǎn)細胞設(shè)計，效率突破瓶頸

原代細胞轉(zhuǎn)染效率高達80%+：用戶實測數(shù)據(jù)顯示，人原代Treg細胞中CD3基因敲低效率超過80%，與說明書中的流式數(shù)據(jù)（86% CD3陰性率）高度一致。

難轉(zhuǎn)細胞系的救星：無論是懸浮細胞還是貼壁細胞，均能穩(wěn)定遞送Cas9 mRNA和sgRNA，共表達率超90%。

2. 安全無憂：非病毒、無毒性、零殘留

基于自組裝蛋白納米顆粒技術(shù)，無需病毒載體或脂質(zhì)體，避免基因組整合風險，顯著降低細胞毒性。

轉(zhuǎn)染后細胞活力恢復快，第二天即可正常培養(yǎng)，實驗周期大幅縮短。

3. 操作極簡，節(jié)省成本

預混試劑+明確步驟：只需按表配置Reagent A/B/C，孵育后即可完成轉(zhuǎn)染。

無需耗費高成本構(gòu)建基因敲除鼠，直接實現(xiàn)T細胞穩(wěn)定基因高效敲除。

技術(shù)揭秘：蛋白納米顆粒如何實現(xiàn)高效遞送？

ProteanFect CRISPRMax的核心在于其自組裝蛋白納米顆粒技術(shù)：

高效負載：帶正電的納米顆粒通過靜電作用吸附Cas9 mRNA和sgRNA，形成穩(wěn)定復合物。

精準遞送：復合物通過內(nèi)吞作用進入細胞后，迅速釋放核酸，避免溶酶體降解。

安全釋放：無需依賴病毒或脂質(zhì)體的膜融合機制，減少細胞損傷。

實驗驗證：

靶向人TRAC基因的sgRNA轉(zhuǎn)染原代T細胞后，TIDE測序顯示編輯效率達88.5%，與流式結(jié)果高度吻合。

EGFP mRNA共轉(zhuǎn)染陽性率超90%，輕松監(jiān)控轉(zhuǎn)染效果。

數(shù)據(jù)分享：高效基因編輯，從ProteanFect開始

使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒轉(zhuǎn)染人原代 T 細胞，使用試劑盒中的 human TRAC-sgRNA 陽性對照敲除 TRAC 基因。在轉(zhuǎn)染 72 小時后，收集細胞，在蛋白水平（圖 1）和 DNA 水平（圖 2）檢測基因敲除的效率。

圖 1. 使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒編輯人原代 T 細胞中 TRAC基因后，TCR 蛋白表達的流式檢測結(jié)果。流式結(jié)果顯示，陽性對照組中約 86%的 T 細胞為 CD3陰性，表明該試劑盒同時遞送 Cas9 mRNA/sgRNA，總細胞群中約有 86%細胞的 TRAC 基因被成功編輯。

圖 2.使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒編輯人原代 T 細胞中 TRAC 基因的測序分析結(jié)果。收集轉(zhuǎn)染后的總細胞提取基因組 DNA，對靶點位置 PCR 擴增（正向引物序列：GCAGTATTATTAAGTAGCCCT，反向引物序列：AACAAGGCTCACTGTTTCTT）并進行Sanger 測序，通過 TIDE 對測序結(jié)果進行分析，結(jié)果顯示陽性對照組中靶點基因被編輯的比例約為 88.5%，與流式檢測蛋白水平的敲除結(jié)果（CD3-TCR 流式陰性比例）相當。

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