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三維（3D）凝膠制備方法
背景簡介：
膠原蛋白是脊椎動物體內(nèi)豐富的蛋白質(zhì)，存在于皮膚、軟骨、骨、椎間盤、血管、肌腱、韌帶和角膜中，是細胞外基質(zhì)（ECM）的主要成分。I型膠原由兩條相同的α1鏈和一條不同的α2鏈（1）組成，形成稱為原膠原的三螺旋結(jié)構(gòu)。這種三螺旋構(gòu)象增加了組織的結(jié)構(gòu)強度和抗酶降解能力，在形成細胞外基質(zhì)過程中起著關(guān)鍵作用。
膠原蛋白有助于促進組織再生和/或靶向藥物釋放，因為它具有低抗原性，低毒、高水溶性、高生物降解性。I型膠原結(jié)合整合素，促進細胞遷移、附著以及增殖和分化。盡管通過胃蛋白酶消化從原膠原中去除N-和C-末端原膠原被廣泛用于工業(yè)用途，但原膠原作為含有交聯(lián)末端肽的天然膠原支架可能是有益的。
Chondrex公司提供酸性I型原膠原溶液，可用于傳統(tǒng)的二維（2D）系統(tǒng)以及三維（3D）凝膠中的支架，用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。
品牌 | Chondrex |
貨號 | 1203 |
產(chǎn)品名稱 | 可溶性I型膠原 |
應用 | 用于傳統(tǒng)的二維（2D）系統(tǒng)以及三維（3D）凝膠中的支架，用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。 |
規(guī)格 | 4 mg/ml x 12.5 ml (sterile filtered) |
形態(tài) | 溶于0.01M HCL |
來源 | 豬 |
內(nèi)毒素 | ＜1 EU/ml |
純度 | ＞95% I 膠原 |
保存 | 4℃ |
穩(wěn)定性 | 6月 |
操作流程 | 包被（注：具體的包被的條件需要根據(jù)培養(yǎng)系統(tǒng)優(yōu)化） 1.用0.02mol/L的鹽酸稀釋4mg/ml的膠原到50-100ug/ml。 2.溫和混勻稀釋后的溶液。 3.取適量的稀釋后的膠原加入孔內(nèi)或板內(nèi)。 注：保證整個表面都是包被的。 4. 37℃或室溫孵育1-2小時 5. 棄掉所有溶液。 6.用培養(yǎng)基或者PBS漂洗包被表面。 7.包被好的孔或板2-8℃保存或者空氣中晾干（如果保持無菌） 三維凝膠制備流程：
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