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血清和血漿制備方法說明

來源:上海遠慕生物科技有限公司   2024年04月18日 10:08  

  血清和血漿均是不含細(xì)胞(包括血小板)等有形成分的血液液體部分,其主要區(qū)別是血清不含凝血因子和血小板,血漿則含有凝血因子,它們的制備方法如下:

  1、血清的制備:獲得的血液不能抗凝,盛于離心管或可以離心的器皿中,靜置或置37℃環(huán)境中促其凝固,待血液凝固后,將其平衡后離心(一般為3000rpm,離心 5~10min),得到的上清液即為血清,可小心將上清吸出(注意切勿吸出細(xì)胞成分),分裝備用。

  2、血漿制備:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑(抗凝劑:血液 = 1:9,將血液加到一定量后顛倒混勻,離心(離心條件同上)后所得的上清液即為血漿。初用者最好將上清移至另一清潔容器,吸出血漿時用毛細(xì)吸管貼著液面逐漸往下吸,切忌不能吸起細(xì)胞成分。

  3、富含血小板血漿制備:將獲得的血液經(jīng)800rpm,離心5min,其上清即為富含血小板血漿。

  血漿與血清區(qū)別

  血清

  血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。

  血漿

  相當(dāng)于結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)。是血液的重要組成分,呈淡黃色液體(因含有膽紅素)。血漿的化學(xué)成分中,水分占90~92%,溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱,用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血漿蛋白質(zhì)的功能有:維持血漿膠體滲透壓;組成血液緩沖體系,參與維持血液酸堿平衡;運輸營養(yǎng)和代謝物質(zhì),血漿蛋白質(zhì)為親水膠體,許多難溶于水的物質(zhì)與其結(jié)合變?yōu)橐兹苡谒奈镔|(zhì);營養(yǎng)功能,血漿蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸,可用于合成組織蛋白質(zhì)或氧化分解供應(yīng)能量;參與凝血和免疫作用。血漿的無機鹽主要以離子狀態(tài)存在,正負(fù)離子總量相等,保持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經(jīng)-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學(xué)成分常在一定范圍內(nèi)不斷地變動,其中以葡萄糖、蛋白質(zhì)、脂肪和激素等的濃度最易受營養(yǎng)狀況和機體活動情況的影響,而無機鹽濃度的變動范圍較小。血漿的理化特性相對恒定是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的首要表現(xiàn)。

  血清與血漿的區(qū)別,主要在于血清不含纖維蛋白原,纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白,具有凝血作用

  藥動實驗大部分情況下用血漿,一般血漿藥物濃度能反映藥物的分布情況,也比血清量多一些。藥代動力學(xué)不僅僅是做血中的藥物濃度,還要做血漿蛋白結(jié)合率。藥物代謝動力學(xué)研究,主要測血漿中的藥物濃度,但是如果血漿中中含有的抗凝劑影響藥物濃度的測定,就應(yīng)使用血清樣品。

  血漿的制備:將采取的血漿置含抗凝劑(如:肝素、草酸鹽、枸櫞酸鹽、EDTA、氟化鈉等)試管中,混合后,2500~3000rpm離心5min,取上清液即為血漿。

  血清的制備:將采取的血漿在室溫下至少放置30min到1h,待凝結(jié)出血餅后,用細(xì)竹棒或玻璃棒輕輕撥去血餅,然后以2500~3000rpm離心5-10min,取上清液,即為血清。

  血漿、血清、全血的優(yōu)缺點

  血漿與血清中的藥物測定值通常是相同的,而且血成分更能接近于組織液,測定血漿與血清中藥物濃度比全血更能反映機體的具體情況

  優(yōu)點 缺點

  血漿 處理速度快,分離速度快, 獲取量大; 不如血清干凈

  血清 干凈,更具有代表性; 獲取量小,處理時間長

  當(dāng)藥物與紅細(xì)胞結(jié)合,而且動力學(xué)行為與在血漿中不同,須采全血進行研究。

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