增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）概述

GFP由238個(gè)殘基組成。GFP序列中的65-67位殘基（Ser65-Tyr66-Gly67）可自發(fā)形成熒光發(fā)色基團(tuán)——對(duì)羥基苯咪唑啉酮GFP的激發(fā)光譜在400nm附近有一個(gè)主激發(fā)峰，在470nm附近有一個(gè)次激發(fā)峰。發(fā)射光譜在505nm附近有一尖銳的主發(fā)射峰，在540nm附近有一肩峰GFP的化學(xué)性質(zhì)相當(dāng)穩(wěn)定，無光漂白現(xiàn)象（Photobleaching），用甲醛固定和石蠟包埋亦不影響其熒光性質(zhì)。在細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)領(lǐng)域中，綠色熒光蛋白基因常被用作報(bào)告基因。

現(xiàn)在，應(yīng)用廣泛的是紅移變體增強(qiáng)型GFP（EGFP）。諸如EGFP這些紅移變體的大激發(fā)峰發(fā)生紅向移動(dòng)，大約為490nm，這一波長(zhǎng)也恰好是多數(shù)分光設(shè)備、流式細(xì)胞儀及共聚焦顯微鏡的常用波長(zhǎng)。EGFP有兩個(gè)突變，當(dāng)被藍(lán)光激發(fā)時(shí)，它發(fā)出的熒光要比wtGFP亮30-40倍。wtGFP和包括EGFP在內(nèi)的多數(shù)變體半衰期長(zhǎng)，所以不適合精確追蹤表達(dá)的減少或損耗。物學(xué)領(lǐng)域中，綠色熒光蛋白基因常被用作報(bào)告基因。

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 以上資料來自小編MSQ,2023.09.27
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