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衍生化是指被測(cè)物質(zhì)與相應(yīng)的試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)
衍生化是指被測(cè)物質(zhì)與相應(yīng)的試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，改變被測(cè)物質(zhì)的化學(xué)和物理性質(zhì)，提高被測(cè)物質(zhì)的檢測(cè)靈敏度，改善被測(cè)物質(zhì)混合物的分離度，從而達(dá)到利于分析的目的。衍生化在HPLC分析中應(yīng)用廣泛，其中在線柱后衍生使用居多。傳統(tǒng)的在線柱后衍生需要一個(gè)獨(dú)立的泵來(lái)輸送衍生試劑以實(shí)現(xiàn)衍生的目的，但這些額外的獨(dú)立裝置有時(shí)由于與液相色譜系統(tǒng)本身不能進(jìn)行很好的聯(lián)用，往往導(dǎo)致運(yùn)行不甚理想。
柱后衍生裝置由于具有兩個(gè)獨(dú)立的泵和流路，一個(gè)泵進(jìn)行分析，另外一個(gè)泵可以完成如輸送衍生試劑等的輔助功能，可以很好地實(shí)現(xiàn)在線柱后衍生應(yīng)用，而且這些功能很多情況只需要一個(gè)簡(jiǎn)單的柱后三通或反應(yīng)管的連接就可以實(shí)現(xiàn)。此外，在HPLC和MS聯(lián)用時(shí)，為了增強(qiáng)離子化效率，需要另外的流路泵入甲酸或乙腈，使用賽默飛雙三元液相色譜系統(tǒng)也可以簡(jiǎn)單方便地實(shí)現(xiàn)這樣的功能。
反梯度補(bǔ)償技術(shù)是指在色譜柱后進(jìn)入檢測(cè)器前加入另一與分析時(shí)溶劑組成相同但比例相反的溶劑，使進(jìn)入檢測(cè)器的溶劑濃度保持不變，從而使檢測(cè)條件更加穩(wěn)定，提高檢測(cè)效果。當(dāng)使用基于霧化機(jī)理的檢測(cè)器進(jìn)行梯度分析時(shí)，由于被測(cè)物質(zhì)的響應(yīng)值與霧化效率密切相關(guān)，而流動(dòng)相的組成是影響霧化效率的重要因素，但由于梯度分析時(shí)流動(dòng)相的組成在不斷改變，樣品中各組分的霧化效率也隨著在不斷變化，這將直接影響待測(cè)物質(zhì)響應(yīng)的一致性。使用柱后衍生裝置，通過(guò)應(yīng)用反梯度補(bǔ)償技術(shù)可以避免該因素對(duì)檢測(cè)的影響，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)物的準(zhǔn)確分析。
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