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BH0177MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細胞(STR鑒定)
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • BH0177 產(chǎn)品型號
  • 語純生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):44更新時間:2025-04-28 09:40:06

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10^6
貨號 BH0177 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細胞(STR鑒定)
產(chǎn)品貨號:BH0177
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹

MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細胞(STR鑒定)

細胞描述

該細胞系的母細胞株MM.1是從一位對類固醇療法產(chǎn)生抗藥性的多發(fā)性骨髓瘤患者的外周血中建立的。MM.1R對地塞米松耐藥。近緣細胞系MM.1S也是從MM.1中分離出來的,但對地塞米松敏感。該細胞復(fù)蘇后需要兩周左右才能恢復(fù)正常生長。

細胞特性

1) 來源:人、女性、外周血

2) 形態(tài)成淋巴瘤細胞,懸浮和輕微的貼壁同時存在

3) 含量:>1x106細胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25或者1mL凍存管包裝

5) 用途:僅供科研使用。

運輸和保存:干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞:(11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。(2T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理:

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3半貼細胞和貼壁不牢(懸?。┘毎?/span>T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用專用培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代,傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收。

4備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。  

細胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備1640(培養(yǎng)基,優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %P/S青霉素-鏈霉素 1%

2) 注意事項:

a.該細胞同時存在懸浮生長和輕微的貼壁狀態(tài)。

b.該細胞復(fù)蘇后需培養(yǎng)2周左右時間,才能恢復(fù)正常生長狀態(tài)。

c.細胞密度不可過高,在細胞匯合前進行傳代,過度融合生長細胞容易產(chǎn)生死細胞團。

3) 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

4) 凍存液90%血清,10%DMSO現(xiàn)用現(xiàn)。

二. 細胞處理

1)凍存細胞的復(fù)蘇

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,專用培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞,傳代可以參考以下方法:

該細胞是一種混合生長的細胞;細胞既可以以輕度附著的單層形式生長,也可以以懸浮液形式生長??梢酝ㄟ^添加新鮮培養(yǎng)基來維持培養(yǎng)?;蛘?,可以通過將貼壁細胞用細胞刮鏟刮入含有漂浮細胞的培養(yǎng)基中,通過離心收集細胞,將細胞沉淀重懸于新鮮培養(yǎng)基中并分配到新的培養(yǎng)瓶中來對細胞進行傳代。建議收貨后的第一次傳代密度為1:2進行。后續(xù)的傳代可根據(jù)實際情況按1:2~1:4的比例進行。

3) 細胞凍存收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項:

 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細胞(STR鑒定)

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