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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 0.3ml甘油菌 |
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貨號 | 96107-01 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號:96107-01
產品規(guī)格:0.3ml甘油菌
本產品僅供科學研究或進一步生產使用,不可用于臨床診斷或治療。
BL21(DE3)菌株
產品簡介
BL21(DE3)菌株用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(如 pET 系列)的基因。λ噬菌 體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 BL21 的染色體上,所以稱為 BL21(DE3)??赏?時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX,pMAL 等質粒的蛋白表達。
保藏條件: -20℃保存(復溶液于 2-8℃保存);
操作說明:
本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌時可以不用全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液 體培養(yǎng)即可。也可以全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,細菌的活力會逐漸下降。
為保證菌種純正,避免其它細菌污染,盡量先劃平板,然后再挑單克隆菌落進行后續(xù)操作。
冷凍管開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉嚴格消毒冷凍管蓋。
菌株復溶:無菌環(huán)境中旋開裝有復溶液的滴瓶蓋,吸取 1ml 左右復溶液,加入到冷凍管中。輕輕振 蕩,使凍干菌株溶解呈懸浮狀。
菌株復壯:用無菌吸管吸取菌懸液,轉移到復溶液滴瓶中。做好標識,在適宜溫度下培養(yǎng)。細菌 在 30-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24-48h,真菌在 23-28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24-72h(必要時,可適當延長培養(yǎng) 時間)。
菌株傳代:將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中(盡量增大接種 量:如用無菌吸管吸取≥50 μL 新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基,邊移動邊緩慢釋放),適宜溫度下培養(yǎng), 用以菌株的保藏、傳代及制備工作菌株。 注意事項: 1、菌種活化前,將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中,長時間室溫下放置會導致菌種衰退; 2、冷凍管開封、凍干粉復溶、菌株恢復培養(yǎng)等操作應在無菌條件下進行; 3、一些菌種經過冷凍干燥保存后,延遲期較長,部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長; 4、苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,敬請正確選擇,不清楚時來電詢問; 5、某些厭氧菌的培養(yǎng),自開封到接種完成,均需以無氧氣體充填,以保持厭氧狀態(tài);培養(yǎng)過程中 亦要保持厭氧狀態(tài); 6、某些菌種,如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要 5-10% CO2 促進生長; 7、如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動、復溶液渾濁等異常情況,應停止使用對應產品; 8、部分菌種有致病性、擴散性,請專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護性操作。
BL21(DE3)菌株