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轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞U937人白血病細(xì)胞條件與方法2021/11/10
轉(zhuǎn)染條件：細(xì)胞數(shù)量：電訊siRNA濃度：20uM/L培養(yǎng)板：6孔板轉(zhuǎn)染試劑用量：10ulsiRNA用量：電訊轉(zhuǎn)染試劑：AD600150，AdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染時間：15小時血清：Z7...
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞（RAW264.7）的培養(yǎng)要點及高效轉(zhuǎn)染2021/11/10
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞（RAW264.7）是通過Abelson鼠白血病病毒誘導(dǎo)BALB/c小鼠產(chǎn)生腫瘤后得到的細(xì)胞株。其在醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用十分普遍，是許多白血病相關(guān)研究模型的常用細(xì)胞株，在微生物學(xué)、...
難轉(zhuǎn)染細(xì)胞Thp-1高效率轉(zhuǎn)染條件分享2021/11/10
Thp-1細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)染條件分享一、轉(zhuǎn)染材料準(zhǔn)備1.轉(zhuǎn)染試劑用量：10ul2.siRNA濃度：20um/L3.細(xì)胞密度：1*106-1*1054.轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板：6孔板5.轉(zhuǎn)染試劑：AdvancedDN...
細(xì)胞STR鑒定相關(guān)問題匯總2021/11/10
STR（ShortTandemRepeats，短串聯(lián)重復(fù)序列）分析已被國際細(xì)胞系鑒定協(xié)會（ICLAC：InternationalCellLineAuthenticationCommittee)、ATC...
初代細(xì)胞培養(yǎng)——消化培養(yǎng)法2021/11/8
材料與儀器組織Hanks培養(yǎng)液胰蛋白酶吸管平皿培養(yǎng)瓶燒杯攪拌器三角燒瓶不銹鋼篩眼科剪眼科鑷計數(shù)板實驗步驟1.準(zhǔn)備取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘；2.布局點燃酒精燈（或煤氣燈），...
成纖維細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)血管生成模型實驗2021/11/8
材料與儀器成纖維細(xì)胞肝素PBS牛血清蛋白FGFCO2培養(yǎng)箱96孔培養(yǎng)板光學(xué)顯微鏡酶標(biāo)儀實驗步驟一、成纖維細(xì)胞生長因子和肝素誘導(dǎo)基底膜蛋白提取物內(nèi)的血管生成模型1.Matrigel為一種基底膜提取物，主...
背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的原代培養(yǎng)實驗步驟2021/11/8
材料與儀器孵化8-12d的雞胚。孕15d及新生1-3d的大、小鼠仔鼠含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基神經(jīng)元維持培養(yǎng)基(Neurobasal+B27+谷氨酰胺+20ngmlNGF)10µM阿...
酵母和細(xì)菌蛋白質(zhì)的代謝放射標(biāo)記的方法2021/11/8
材料與儀器細(xì)胞基本培養(yǎng)基實驗步驟1.接種細(xì)胞于只含有必需氨基酸和輔因子的已知成分的基本培養(yǎng)基，于合適溫度中度振蕩培養(yǎng)過夜。2.用新鮮的基本培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物，繼續(xù)溫育至107細(xì)胞/ml（酵母）或?qū)?shù)期中...
用[35S]蛋氨酸和[35S]半胱氨酸標(biāo)記哺乳動物細(xì)胞的方法2021/11/8
材料與儀器細(xì)胞培養(yǎng)基實驗步驟1.制備活躍生長著的細(xì)胞。從單層培養(yǎng)細(xì)胞（約鋪滿75%表面積）中吸去培養(yǎng)基。用預(yù)熱至37℃的無血清培養(yǎng)基沖洗兩次（培養(yǎng)基中應(yīng)該不含蛋氨酸和半胱氨酸）。對于懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，通過...
成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層實驗步驟2021/11/5
材料與儀器鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmolLEDTA受精后8h的胚胎FBSLDF基礎(chǔ)培養(yǎng)液LDF原代培養(yǎng)液LDF維持培養(yǎng)液D培養(yǎng)液Holtfreter緩沖液培養(yǎng)瓶實驗步驟鱒魚胚胎...
玻璃器皿的準(zhǔn)備和滅菌步驟2021/11/5
材料與儀器消毒劑（次氯酸鹽）清潔劑浸泡池試管刷不銹鋼籃子鋁箔無菌指示器無菌指示膠帶或塞滅菌烤箱實驗步驟一、玻璃器皿的收集和清洗1.玻璃器皿用后要立即將其收集到含有消毒劑（次氯酸鹽，用清潔劑稀釋，最少應(yīng)...
報告基因：β-半乳糖苷酶的原位染色實驗方法2021/11/5
材料與儀器β-gal表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞D-PBSA染色液6孔培養(yǎng)板恒溫箱倒置顯微鏡實驗步驟一、材料非消毒物品1.D-PBSA2.底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成20mg/mL，...
表皮角質(zhì)形成細(xì)胞模型構(gòu)建實驗方法2021/11/5
材料與儀器皮膚組織熱解素胰蛋白酶SKDM角質(zhì)形成細(xì)胞生長培養(yǎng)液D-PBSAEDTA分析級甘油dispase低溫保存管尼龍網(wǎng)離心管細(xì)胞過濾器手術(shù)刀彎鑷實驗步驟一、材料無菌實驗前3天制備飼養(yǎng)層（見方案23...
白細(xì)胞分類計數(shù)實驗步驟2021/11/5
材料與儀器推玻片一塊干凈玻片數(shù)塊消毒的針頭75%酒精棉球蠟筆擦鏡紙顯微鏡瑞氏染液蒸餾水顯微鏡油二甲苯實驗步驟一、血涂片制作1.以75%酒精棉球消毒指頭，用消毒的針頭刺進局部，先拭去第一滴血，然后取血一...
學(xué)會這6步，輕松搞定transwell實驗2021/11/2
做腫瘤研究的人，很少有不知道transwell實驗的，它是用來研究腫瘤細(xì)胞的遷移侵襲轉(zhuǎn)移情況的一種簡便快捷的實驗方法，還可以構(gòu)建兩種細(xì)胞的共培養(yǎng)體系以及趨化性試驗。今天咱們就來講講怎么做腫瘤細(xì)胞的侵襲...
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