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上海禾午生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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當(dāng)前位置:上海禾午生物科技有限公司>>質(zhì)粒菌株>>質(zhì)粒>> P3144pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質(zhì)粒

pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質(zhì)粒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)P3144

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時(shí)間:2024-05-30 16:40:57瀏覽次數(shù):407次

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供貨周期 現(xiàn)貨 貨號(hào) P3144
規(guī)格
pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質(zhì)粒
啟動(dòng)子U6
復(fù)制子pUC
原核抗性Amp
真核抗性Puro
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37℃
表達(dá)宿主哺乳細(xì)胞
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞,慢病毒
質(zhì)粒用途基因沉默
片段類型shRNA
原核抗性氨芐青霉素
真核抗性嘌呤霉素

注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無(wú)菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來(lái)溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;

2、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;

3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min;

4、42熱激90s,再冰浴2min;

5、加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒

 

pCDH-CMV-MCS-EF1-Hygro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLKO.1-EGFP-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVX-TetOne-Puro蛋白表達(dá),誘導(dǎo)質(zhì)粒
pLVML-3×FLAG-MCS-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCDH-CMV-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pDC316-ZsGreen1-shRNA基因沉默質(zhì)粒
041 pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean基因沉默質(zhì)粒
pSIH1-H1-copGFP-T2A-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro基因沉默質(zhì)粒
pLVX-shRNA2基因沉默質(zhì)粒

 

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