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跨膜細胞電阻儀的操作步驟與注意事項

閱讀：1232 發(fā)布時間：2024-4-8

　　跨膜細胞電阻儀是一種用于測量細胞層電阻的儀器，廣泛應(yīng)用于研究細胞間的緊密連接和屏障功能。在實驗過程中，正確操作跨膜細胞電阻儀并注意相關(guān)事項至關(guān)重要。

　　一、操作步驟

　　1.準備實驗材料：跨膜細胞電阻儀、細胞培養(yǎng)器、細胞培養(yǎng)基、胰酶、離心管、移液器等。

　　2.細胞培養(yǎng)：將細胞種植在細胞培養(yǎng)器上，加入適量的細胞培養(yǎng)基。將培養(yǎng)器放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，直至細胞達到適當?shù)膫鞔壤?/div>

　　3.裝載細胞：將細胞懸液用胰酶消化后，計數(shù)并調(diào)整細胞濃度。將一定數(shù)量的細胞懸液加入到儀器的上室和下室中，確保細胞能夠覆蓋整個膜表面。

　　4.測量電阻：將儀器接入恒溫水浴槽，保持溫度在37℃。使用移液器輕輕攪拌下室中的細胞懸液，以消除濃度極化現(xiàn)象。記錄初始電阻值。

　　5.數(shù)據(jù)分析：在一定時間內(nèi)監(jiān)測并記錄電阻值的變化，計算電阻的相對增減率。分析數(shù)據(jù)，評估細胞層的緊密連接和屏障功能。

　　二、注意事項

　　1.選擇合適的細胞株：不同類型的細胞株具有不同的生理功能和特性，因此在實驗前需充分了解所選細胞株的特性，以確保實驗結(jié)果的準確性。

　　2.維持適宜的培養(yǎng)條件：細胞的生長和分化受到諸多因素的影響，如溫度、濕度、pH值等。在實驗過程中，應(yīng)嚴格控制這些條件，以保證細胞的正常生長。

　　3.避免污染：細胞培養(yǎng)過程中容易受到細菌、真菌等微生物的污染。因此，在操作過程中應(yīng)嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，定期更換手套，并對實驗器皿進行消毒。

　　4.確保儀器的準確性：在使用前，應(yīng)檢查儀器是否工作正常，測量電極是否潔凈。測量過程中，應(yīng)避免電極與細胞或細胞培養(yǎng)基直接接觸，以免影響測量結(jié)果。

　　5.實驗結(jié)果的可靠性：實驗數(shù)據(jù)的準確性受多種因素影響，如操作誤差、測量時間、細胞密度等。因此，在實驗過程中應(yīng)盡量減少誤差，重復(fù)測量并取平均值，以提高實驗結(jié)果的可靠性。

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