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甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎原理和使用方法
閱讀：428 發(fā)布時間：2024-7-19
一、試驗原理：
用于分離培養(yǎng)病原性金黃SE葡萄球菌。
蛋白胨和牛肉粉提供氮源、維生素和生長因子；D—甘露醇為可發(fā)酵糖類；7.5%濃度氯化鈉可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生長；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；酚紅為pH指示劑，金黃SE葡萄球菌可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產酸，使菌落周圍變黃，并能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產生暈圈。
二、培養(yǎng)基配方（g/L）：
蛋白胨 | 10.0 |
D-甘露醇 | 10.0 |
牛肉粉 | 2.5 |
氯化鈉 | 75.0 |
酚紅 | 0.025 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 7.4±0.2 25℃ | |
三、試驗方法：
粉體裝培養(yǎng)基的使用：
1. 稱取本品112.5g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，煮沸1分鐘，121℃高壓滅菌15分鐘，待培養(yǎng)基冷卻至45-50℃時，無菌操作，加入50%卵黃乳液30ml，搖勻，傾入無菌平皿，備用。
2. 制備質控菌液。
3. 選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml，均勻涂布于平板上，每一稀釋度接種兩個平板。用1μL接種環(huán)取非目標菌質控菌液1環(huán)，將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體，在平板表面劃六條平行直線，同時接種兩個平板。
4. 36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時，記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株，36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時：
質控菌株菌株編號接種量(CFU)參比或計數培養(yǎng)基方法質控評定標準其他特征大腸埃希氏菌ATCC25922//半定量G≤1/傷寒SHA門氏菌ATCC14028//G≤1/金黃SE葡萄球菌ATCC653820-200TSA定量PR≥0.7黃色菌落，菌落周圍有暈圈金黃SE葡萄球菌ATCC2592320-200PR≥0.7黃色菌落，菌落周圍有暈圈表皮葡萄球菌CMCC(B)2606920-200PR≥0.7紅色菌落，沒有暈圈
五、注意事項：
本培養(yǎng)基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
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