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技術(shù)文章

MLCB寒天培地培養(yǎng)基的試驗(yàn) 原理、試驗(yàn)方法及結(jié)果

閱讀:595          發(fā)布時(shí)間:2024-5-30

一、試驗(yàn)原理:

  本產(chǎn)品用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)。

  酵母浸粉、蛋白胨和牛心浸粉提供微生物生長所需的碳源和氮源;氯化鈉用于維持均衡的滲透壓,甘露醇作為可發(fā)酵的糖類被沙門氏菌利用產(chǎn)酸;沙門氏菌產(chǎn)生的脫羧酶與L-賴氨酸鹽酸鹽反應(yīng)生成堿性物質(zhì);在堿性條件下,硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨與沙門氏菌產(chǎn)生的硫化氫反應(yīng)使得菌落的顏色呈現(xiàn)黑色;煌綠和結(jié)晶紫可抑制大腸桿菌等革蘭氏陽性菌的生長;瓊脂起凝固的作用。


二、培養(yǎng)基配方(g/L):

表1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基配方

成分

添加量

酵母浸粉

5.0

蛋白胨

10.0

牛心浸粉

2.0

氯化鈉

4.0

甘露醇

3.0

L-賴氨酸鹽酸鹽

5.0

硫代硫酸鈉

4.0

檸檬酸鐵銨

1.0

煌綠

0.0125

結(jié)晶紫

0.01

瓊脂

15.0

pH值6.8±0.2 

25℃


三、試驗(yàn)方法:

  1.稱取本品49.0g,加熱煮沸溶解于1000mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量)中,冷至50-55℃時(shí),傾入無菌平皿,備用;

  2.質(zhì)控菌液按國標(biāo)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成;

  3.用接種環(huán)取一環(huán)相應(yīng)菌液劃線接種于無菌培養(yǎng)基上,36±1℃需氧培養(yǎng)18-24h。


四、試驗(yàn)結(jié)果判斷:

  1.外觀
  此干燥培養(yǎng)基粉末均勻,呈淡黃色,煮沸滅菌后制備好的培養(yǎng)基為藍(lán)紫色透明固態(tài)。

  2.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

  接種以下質(zhì)控菌株,放入培養(yǎng)箱中,于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24 h,觀察試驗(yàn)結(jié)果。

表2 MLCB寒天培地培養(yǎng)基不同菌株質(zhì)量控制結(jié)果

質(zhì)控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

質(zhì)控情況

菌落特征

腸炎沙門氏菌

CMCC(B) 50746

/

+++

黑色中心菌落

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC 14028

/

+++

黑色中心菌落

大腸埃希氏菌

ATCC 25922

/

-

抑制

金黃色葡萄球菌

ATCC 25923

/

-

抑制


圖1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果



注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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