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人白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒的操作步驟及注意事項

閱讀:1030        發(fā)布時間:2023/2/7
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操作步驟:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃;
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加;
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min;
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板);
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min;
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
操作注意事項:
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結晶溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。

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