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空消 在投料前，氣路、料路、種子罐、發(fā)酵罐、消泡罐必須用蒸汽進(jìn)行滅菌，消除所有死角的雜菌，保證系統(tǒng)處于無(wú)菌狀態(tài)。 2．1 空氣管路的空消 (1)空氣管路上有三級(jí)預(yù)過(guò)濾器，冷干機(jī)和除菌過(guò)濾器。預(yù)過(guò)濾器和冷干機(jī)不能用蒸汽滅菌，因此在空氣管路通蒸汽前，必須將通向預(yù)過(guò)濾器的閥門(mén)關(guān)閉，使蒸汽通過(guò)減壓閥、蒸汽過(guò)濾器，然后進(jìn)入除菌過(guò)濾器。 (2)除菌過(guò)濾器的濾芯不能承受高溫高壓，因此，蒸汽減壓閥必須調(diào)整在0．13Mpa，不得超過(guò)0．15MPa。 (3)空消過(guò)程中，除菌過(guò)濾器下端的排氣閥應(yīng)微微開(kāi)啟，排除冷凝水。 (4)空消時(shí)間應(yīng)持續(xù)40分鐘左右，當(dāng)設(shè)備初次使用或長(zhǎng)期不用后啟動(dòng)時(shí)，采用間歇空消，即次空消后，隔3—5小時(shí)再空消一次，以便消除芽孢。 (5)經(jīng)空消后的過(guò)濾器，應(yīng)通氣吹干，約20～30分鐘，然后將氣路閥門(mén)關(guān)閉。 2．2 種子罐、發(fā)酵罐、堿罐及消泡罐空消 (1)種子罐、發(fā)酵罐、堿罐及消泡罐是將蒸汽直接通入罐內(nèi)進(jìn)行空消。 (2)空消時(shí)，應(yīng)將罐上的接種口、排氣閥及料路閥門(mén)微微打開(kāi)，使蒸汽通過(guò)這些閥門(mén)排出，同時(shí)保罐壓為O．13～0．15Mpa。 (3)空消時(shí)間為30～40分鐘，特殊情況下，可采用間歇空消。 (4)種子罐、發(fā)酵罐、消泡罐、酸堿罐空消前，應(yīng)將夾套內(nèi)的水放掉。空消結(jié)束后，應(yīng)將罐內(nèi)冷凝水排掉，并將排空閥門(mén)打開(kāi)，防止冷卻后罐內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓、損壞設(shè)備。空消時(shí)，溶氧、PH電極取出，可以延長(zhǎng)其使用壽命。 3 實(shí)消 實(shí)消是當(dāng)罐內(nèi)加人培養(yǎng)基后，用蒸汽對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的過(guò)程，種子罐、堿罐、消泡罐和發(fā)酵罐實(shí)消的操作過(guò)程相同?？障Y(jié)束后，應(yīng)盡快將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi)，此時(shí)夾套內(nèi)應(yīng)無(wú)冷卻水。培養(yǎng)基在進(jìn)罐之前，應(yīng)先糊化，一般培養(yǎng)基的配方量以罐體全容積的70％左右計(jì)算(泡沫多的培養(yǎng)基為65％左右，泡沫少的培養(yǎng)基可達(dá)75％．80％)，考慮到冷凝水和接種量因素，加水量為罐體全容積的50％左右，加水量的多少與培養(yǎng)基溫度和蒸汽壓力等因素有關(guān)，需在實(shí)踐中摸索。先開(kāi)啟機(jī)械攪拌裝置，使罐內(nèi)物料均勻混合，轉(zhuǎn)速50一100rpm。打開(kāi)夾套蒸汽閥、排汽閥，對(duì)罐內(nèi)培養(yǎng)基預(yù)熱，當(dāng)罐內(nèi)溫度升到90℃時(shí)，關(guān)閉夾套進(jìn)汽閥，
打開(kāi)罐內(nèi)所有進(jìn)汽閥，通人蒸汽。當(dāng)罐溫上升到105℃時(shí)，緩緩打開(kāi)排汽閥，將罐頂冷空氣排掉，持續(xù)五分鐘后，關(guān)閉排汽閥。當(dāng)罐壓升至0．12Mpa，溫度升到121～123℃時(shí)，控制蒸汽閥門(mén)開(kāi)度，保持罐壓不變，30分鐘后停止供汽。打開(kāi)冷卻水的進(jìn)排閥門(mén)，在夾套內(nèi)通水冷卻，當(dāng)罐內(nèi)壓力降至O．05Mpa時(shí)，微微開(kāi)啟排氣閥和進(jìn)氣閥，進(jìn)行通氣攪拌，加速冷卻速度，并保持罐壓為O．05Mpa，直到罐溫降至接種溫度。 4接種 采用火焰封口接種，接種前應(yīng)事先準(zhǔn)備好酒精棉花、鉗子、鑷子和接種環(huán)。菌種裝入三角燒瓶?jī)?nèi)，接種量根據(jù)工藝要求確定。將酒精棉花圍在接種口周?chē)c(diǎn)燃，用鉗子或鐵棒擰開(kāi)接種口，此時(shí)應(yīng)向罐內(nèi)通氣，使接種口有空氣排出。將三角瓶的菌種在火環(huán)中間倒人罐內(nèi)。將接種口蓋在火焰上滅菌后擰緊。接種后即可通氣培養(yǎng)，罐壓保持在0．05Mpa.