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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人骨髓間充質(zhì)干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人骨髓間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人骨髓間充質(zhì)干原代細胞 | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells | 貨號 | YS-01X7506 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數(shù)的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
原代膠質(zhì)細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml | NMDAR2B： 谷酸受體2B抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MEF2B 肌細胞增強因子2B抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-TRAF1/FITC 熒光素標記壞死因子受體相關(guān)因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 壞死因子α誘導蛋白1抗原 0.5mg | Anti-Nur77/GFRP 孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-FoxP3/FITC 熒光素標記叉頭蛋白3-T細胞轉(zhuǎn)錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLK/Fyn 酪蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Paxillin/FITC 熒光素標記樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-AQP4/FITC 熒光素標記水通道蛋白-4蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293 人腎管狀上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人膀胱癌細胞;5637(HTB-9) | HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD5L Others Human 人 CD5L / API6 人細胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠黑質(zhì)細胞(RNsn)(1×106) |
MCF 7B(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼倉鼠腎細胞) | IgG Others Human 人 IgG1 Fc CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB | 人骨髓間充質(zhì)干原代細胞Anti-Nur77/GFRP 孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標簽) |
內(nèi)臟脂肪細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | BEL-7404(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細胞;Saos-2 |
VERO細胞，非洲綠猴腎細胞 人大細胞肺癌細胞,NCI-H661細胞 CL-0420R 1610(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2 | Cobra poison Protein： 眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體 0.2ml |
Human platelet membrane glycoprotein II b III a,GP- II b III a ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | ANGPT2 Others Mouse 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
元特異性烯醇化酶抗體 Anti-NSE 0.1ml | NE-B(Human Noradrenaline Bitartas) ELISA Kit 人重去甲 96T |
AKT1+2+3： 蛋白激酶AKT1,2,3抗體 0.1ml | SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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