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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-01X8285 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
詳細(xì)介紹
雞主動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
雞主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自主動(dòng)脈組織；主動(dòng)脈是體循環(huán)的動(dòng)脈主干。其運(yùn)行路徑為：升主動(dòng)脈起于左心室，至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動(dòng)脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動(dòng)脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動(dòng)脈裂孔移行為腹主動(dòng)脈，以上為胸主動(dòng)脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動(dòng)脈；髂總動(dòng)脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動(dòng)脈。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在主動(dòng)脈內(nèi)面的單層細(xì)胞，可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài)，當(dāng)其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此，主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機(jī)制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專(zhuān)門(mén)上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管。
英文名稱(chēng) | Chicken Aortic Endothelial Cells | 組織來(lái)源 | 動(dòng)脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8285 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：雞主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源：動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
雞主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的雞主動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的雞主動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647 | Nuclear Pore Complex Proteins： 核孔復(fù)合體蛋白抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MK1/MAPKK1/MKK1 MK1/MAPKK1抗體(N-端) 規(guī)格 0.1ml | Anti-t-PA/FITC 熒光素標(biāo)記組織型纖溶酶原激活劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗原 0.5mg | Anti-NSBP1 核小體結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-FoxO3a (Ser253) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLY 2型豬鏈球菌溶血素抗體 規(guī)格 1ml |
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr754) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-phospho-APP(phospho Thr668) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化APP淀粉樣肽前體蛋白(p-APP Thr668)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | INHBB Others Human 人 Activin B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] | FCRL1 Others Mouse 小鼠 FCRL1 / FCRH1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0903 新生兒表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
EFNB2 Others Human 人 EphrinB2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | TGFB1 Others Human 人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf | 雞主動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞Anti-NSBP1 核小體結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ACO2 Others Mouse 小鼠 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 4T1 小鼠癌細(xì)胞 |
腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | BGC823(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M014小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人急性早幼粒白血病細(xì)胞;HL-60 |
MEG-01細(xì)胞，人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 正常小鼠Leydig細(xì)胞,TM3細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MSCGS | GPSM2： G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml |
TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit 人T細(xì)胞受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體 Anti-TRBF1 1ml | 6-keto-PGF1a(Human 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 人6酮前列腺素F1a 96T |
AIMP3： 抑癌蛋白AIMP3抗體 0.2ml | IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Ierleukin 21 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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