化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的雞脂肪干采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的雞脂肪干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不 含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 雞脂肪干原代細胞 | 組織來源 | 脂肪 |
英文名稱 | Chicken Adipose Stem Cells | 貨號 | YS-01X8283 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
雞脂肪干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成，聚集成 團 的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和 脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能 、 纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存 的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪干細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能 的干細胞，主要恢復組織細胞的修復功能，促進細胞的再生，恢復年輕面容的同時，身體 機能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂 肪干細胞具有很多優(yōu)點：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區(qū)的創(chuàng) 傷較??；④獲得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理 想的種子細胞。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
雞脂肪干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
長尾綠猴腎細胞;4647 | PP ELISA Kit 大鼠Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf198： 1號染色體開放閱讀框198抗體 0.2ml | GPR125： G蛋白偶聯(lián)受體125抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CGI62/C8orf70 8號染色體開放閱讀框70抗體 規(guī)格 0.2ml | p70 S6 kinase alpha： 核糖體p70 S6蛋白激酶抗體 0.1ml |
Anti-NKG2C/FITC 熒光素標記NK細胞受體2C/自然殺傷細胞活化性受體2C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor：G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原 0.5mg |
Rabbit Anti-chi IgG/FITC 熒光素標記兔抗雞IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | MYCBPAP： MYCBPAP抗體 0.1ml |
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 人癌細胞;MDA-MB-435S |
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] | NAMPT Others Human 人 PBEF / Visfatin / NAMPT 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-26502 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium KIT, 真皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml | OMG Others Human 人 OMG / OMGP (aa 1-416) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人腎癌Wilms細胞;G401 大鼠氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 黃牛皮膚細胞;BTA-S2 鼠巨噬細胞，Ana-1細胞 MOLT-4(急性淋巴母細胞白血病細胞) |
成纖維細胞培養(yǎng)基FM-acf-prf | 雞脂肪干原代細胞p70 S6 kinase alpha： 核糖體p70 S6蛋白激酶抗體 0.1ml |
QBC-939, 人膽管癌細胞 腎癌(瘤株),Ke-3細胞 HL-60(急性粒細胞白血病細胞) | 人黑色素瘤細胞;A875 |
小鼠淋巴細胞白血病;L1210 | SCLY Others Human 人 SCLY / Selenocysteine Lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
BT-549(人管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093小鼠胎兒真皮成纖維細胞培養(yǎng)基100mL 人結(jié)直腸腺癌細胞;LoVo | Anti-IKK beta /FITC 熒光素標記核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Rbms3 抑癌基因Rbms3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GC-1, 鼠精原細胞 swiss鼠胚胎成纖維細胞，3T3 swiss細胞 NCL-H548(人胰腺癌細胞) |
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser789) 0酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLK12 12抗體 規(guī)格 0.1ml |
JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit 大鼠c-Jun基末端激酶 96T | TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
化工儀器網(wǎng)