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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的雞肺大動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的雞肺動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 雞肺動脈內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 肺動脈組織 |
英文名稱 | Chicken Pulmonary Artery Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7004 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
雞肺大動脈內(nèi)皮細胞分離自肺大動脈組織；肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行。細胞呈單層多角形鋪路石狀分布；該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。肺大動脈內(nèi)皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
正常大鼠腎細胞;NRK | NPAS3： 細胞PAS結構域蛋白3抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MK6 原活化蛋白激酶MKK6抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 熒光素標記DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原 0.5mg | Anti-CD304/Neuropilin-1 纖毛蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-FOXO3A/FITC 熒光素標記轉錄因子FOXO3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-PDGF-BB/FITC 熒光素標記血小板源性生長因子-BB抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-ApoH/FITC 熒光素標記載脂蛋白H抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人正常細胞;Hs 578Bst 人前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人胚肺二倍體細胞;HL | RCN3 Others Human 人 RCN3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
DPP10 Others Human 人 DPP10 / DPRP3 人細胞裂解液 (陽性對照) | VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SLAMF8 Others Mouse 小鼠 SLAMF8 / BLAME 人細胞裂解液 (陽性對照) | AMIGO2 Others Human 人 AMIGO2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
大額牛皮膚細胞;BFR-S3 | 雞肺動脈內(nèi)皮原代細胞Anti-CD304/Neuropilin-1 纖毛蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
CN1 Others Mouse 小鼠 Coactin 1 / CN1 人細胞裂解液 (陽性對照) | NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 |
腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人表皮黑色素細胞-中色素(HEM)( 5×105 ) MN-c, 小鼠皮質(zhì)元 Mouse |
NRK-52E，大鼠腎細胞 Sars蛋白表達株，293sars181A細胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌細胞) | GGNBP1： 配子生成素結合蛋白1抗體 0.2ml |
CLA(Human cutaneous lymphocyte-associated antigen) ELISA Kit 人皮膚淋巴細胞相關抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Rho相關蛋白激酶1抗體 Anti-ROCK1 0.2ml | SCF/MGF ELISA Kit 大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子 96T |
ABHD1： 肺α/β水解酶蛋白1抗體 0.2ml | PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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