Nucleo-h是一種固相酶免疫測(cè)定法，使用從真核細(xì)胞HeLa中分離的人天然核小體，用于定量和定性檢測(cè)針對(duì)人血清中的核小體及其組分dsDNA和組蛋白。該檢測(cè)是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）鑒別診斷的工具。

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核酸（IgG）ELISA檢測(cè)原理：

核小體是染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，對(duì)細(xì)胞核中DNA的壓縮至關(guān)重要。一個(gè)核小體由四個(gè)組蛋白H2A、H2B、H3和H4組成一個(gè)八聚體，以及146個(gè)堿基對(duì)的雙鏈DNA（dsDNA）以1.75圈/核小體的比率纏繞在核心（H2A、H2B、H3、H4）?八聚體周圍。組蛋白H1與核小體相互作用，與連接的DNA一起將相鄰的核小體連接起來(lái)。

針對(duì)雙鏈DNA（dsDNA）和組蛋白的抗體是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的常見特征。Burlingame等人在1993年S次在小鼠模型中顯示，抗染色質(zhì)抗體的產(chǎn)生是由T細(xì)胞依賴的免疫反應(yīng)誘導(dǎo)的自身抗原。已經(jīng)證明，在SLE的小鼠模型中，最初的自身免疫反應(yīng)是針對(duì)核小體的。因此，抗核小體特異性抗體代表了SLE的特異性和早期標(biāo)志，它們識(shí)別原生核小體分子共享的構(gòu)象表位。隨后，自身免疫反應(yīng)可以多樣化到核小體的成分，DNA和組蛋白，作為分子間擴(kuò)散的一部分。在84-88%的SLE患者中發(fā)現(xiàn)了特異性核小體抗體。

需要重新配制的：

5倍樣本緩沖液1瓶，20毫升 - 5倍濃縮（白色瓶蓋：黃色溶液）

成分：Tris, NaCl, 牛血清白蛋白（BSA）, 疊D化鈉 < 0.1%（防腐劑）

50倍洗滌緩沖液1瓶，20毫升 - 50倍濃縮（白色瓶蓋：綠色溶液）

成分：Tris, NaCl, 吐溫20, 疊D化鈉 < 0.1%（防腐劑）

即用型：

陰性對(duì)照1瓶，1.5毫升（綠色瓶蓋：無(wú)色溶液）

成分：人血清（稀釋），疊D化鈉 < 0.1%（防腐劑）

陽(yáng)性對(duì)照1瓶，1.5毫升（紅色瓶蓋：黃色溶液）

成分：人血清（稀釋），疊D化鈉 < 0.1%（防腐劑）

截止校準(zhǔn)液1瓶，1.5毫升（藍(lán)色瓶蓋：黃色溶液）

成分：人血清（稀釋），疊D化鈉 < 0.1%（防腐劑）

校準(zhǔn)液6瓶，每瓶1.5毫升，濃度分別為0, 3, 10, 30, 100, 300 U/ml

（顏色隨濃度增加而加深：黃色溶液）

成分：人血清（稀釋），疊D化鈉 < 0.1%（防腐劑）

結(jié)合物1瓶，15毫升IgG（藍(lán)色瓶蓋：藍(lán)色溶液）

成分：與辣根過氧化物酶結(jié)合的抗人M疫球蛋白

TMB底物1瓶，15毫升（黑色瓶蓋）

成分：穩(wěn)定的TMB/H2O2

停止液1瓶，15毫升（白色瓶蓋：無(wú)色溶液）

成分：1M鹽酸

微孔板12x8孔條，帶有可拆卸的微孔

涂覆請(qǐng)參見第1段。

技術(shù)參數(shù)：

樣本材料：血清

樣本體積：10微升樣本稀釋1:101，使用1倍樣本緩沖液

總孵育時(shí)間：在20-32°C/68-89.6°F下孵育90分鐘

校準(zhǔn)范圍：0-300 U/ml

分析靈敏度：1.0 U/ml

儲(chǔ)存：在2-8°C/35-46°F下使用原瓶?jī)?chǔ)存，僅限

測(cè)定數(shù)量：96次測(cè)試

文獻(xiàn)參考：

1.Genesis and evolution of antichromatin autoantibodies in murine lupus indicates T-dependent immunization with self antigen.

J Clin Invest 91: 1687-1696.

2. Burlingame RW, Boey ML, Starkebaum G, Rubin RL (1994).

The central role of chromatin in autoimmune response to histones and DNA in systemic

lupus erythematosus.

J Clin Invest 94: 184-192.

3. Chabre H, Amoura Z, Piette JC, Godeau P, Bach JF, Koutouzov S (1995).

Presence of nucleosome-restricted antibodies in patients with systemic lupus erythematosus.

Arthritis Rheum 38: 1485-1491.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。

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