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產(chǎn)品名稱：人表皮成纖維原代細胞
英文名稱：
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：GOY-01X1234
分類：人原代細胞

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

人表皮成纖維細胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的人表皮成纖維細胞采用先蛋白酶消化、后蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人表皮成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

準備DMEM高糖，10% 優(yōu)質胎牛血清。

1）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

2）凍存液：90%培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

2、細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

1、收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

3、用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4、請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的培養(yǎng)基。

5、建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和微生物菌種查詢網(wǎng)技術部溝通交流。

6、該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。

MES-13細胞，小鼠腎小球系膜細胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺細胞;GP-F1  NRK-52E(大鼠小管導管上皮細胞)     PANC-1, 人胰腺癌細胞 肝癌細胞,Hep G2細胞 U-937(組織細胞淋巴瘤細胞)   脂肪細胞系統(tǒng) 兔原代視網(wǎng)膜微血管周細胞 大鼠原代睪丸間質細胞

BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)

RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein

CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標簽)

VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein

大鼠尿卟啉原脫羧酶(UROD)試劑盒 ，英文名： UROD ELISA Kit

Monkey E selectin (E-Selectin/CD62E) ELISA Kit 猴E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒

RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGM-CSFAb(Humanai-Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactoraibody)ELISAKit人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體

細胞氧化酶(DAO)活性熒光定量試劑盒20次

RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit大鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠型纖溶酶原激活物受體   英文名稱：   urokinase-plasmingen activator receptor   規(guī)格：      英文縮寫：   uPA-R

小鼠超敏感度促甲狀腺素   英文名稱：   Mouse ulasensitive Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格：      英文縮寫：   U.TSH

線粒體解偶聯(lián)蛋白2   英文名稱：   Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2   規(guī)格：      英文縮寫：   UCP2

小鼠血管細胞粘附分子-1   英文名稱：   vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1   規(guī)格：      英文縮寫：   VCAM-1

人表皮成纖維原代細胞小鼠酪蛋白酶試劑盒 96T/48T

Human prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒

Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 人結合蛋白4(RBP-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

humanadrencocoicoopichormone,ACTH試劑盒人促腎上腺皮質激素(ACTH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物DNA甲基轉移酶-1(MET-1)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Mouseadiponectin,ADPELISAKit小鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CTSE重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 Protein

ATF2 (Activating Transcription Factor2 0.5mgATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復制因子2(多肽)

CHEK1重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽) Protein

IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽)