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詳細介紹
商品介紹：
微核分析/遺傳毒性分析熒光染料（DAPI）是一種藍色核酸染料，優(yōu)先染dsDNA，表現(xiàn)為可集中結(jié)合在DNA 雙鏈的AT 小溝，結(jié)合后的熒光會發(fā)生20 倍增強。同時，也可以結(jié)合RNA，與DNA 不同，一般認為DAPI 染料結(jié)合于RNA 的AU 區(qū)。DAPI/RNA 的復合體（500nm）有比染料與dsDNA 復合體（460nm）更長的熒光波長。DAPI 是一種常用的多色熒光技術(shù)中的核復染劑。他的藍色熒光可以與綠色、紅色、橙黃色探針形成鮮明對比。 根據(jù)操作說明使用，染料的背景可以很低，幾乎沒有細胞質(zhì)的背景標記。DAPI 可以用在多種實驗應(yīng)用中，如細胞學標記、直接或間接地基于抗體的免疫熒光分析以及mRNA 表達的原味雜交或者與特定的細胞結(jié)構(gòu)熒光試劑進行共染。DAPI 也可以用來分析多色流式細胞術(shù)中。 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：微核分析/遺傳毒性分析熒光染料
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：10mg
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
纖維蛋白原α(FGα)英文名稱：FGα ELISA Kit7號染色體開放閱讀框65抗體包裝0.5mg
纖維蛋白原(FG)英文名稱：FG ELISA Kit基轉(zhuǎn)移cyt-19抗體包裝1g
纖溶抑制因子(TAFI)英文名稱：TAFI ELISA Kit單核趨化蛋白4抗體包裝25g
纖溶原激活物抑制因子2(PAI2)英文名稱：PAI2 ELISA KitCD34抗體包裝5g
纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)英文名稱：PAI1 ELISA Kit白共同抗原抗體包裝1g
夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)英文名稱：CLC ELISA Kit磷化環(huán)磷腺苷反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5g
細胞周期D3(CCND3)英文名稱：CCND3 ELISA Kit間隙連接蛋白37抗體包裝1g
細胞周期D2(CCND2)英文名稱：CCND2 ELISA Kit2型補體受體抗體包裝5g
細胞周期D1(CCND1)英文名稱：CCND1 ELISA Kit唾液轉(zhuǎn)移1/α-2,6唾液轉(zhuǎn)移抗體包裝1g
細胞因子信號轉(zhuǎn)導抑制因子3(SOCS3)英文名稱：SOCS3 ELISA Kit碳酐9抗體包裝5g
細胞外信號調(diào)節(jié)激2(ERK2)英文名稱：ERK2 ELISA Kit色P450 17抗體包裝100g
細胞外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)英文名稱：MEPE ELISA Kit色P450 7A1抗體/膽固7a羥化包裝25g
細胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)英文名稱：ECM1 ELISA Kit膽固24羥化抗體包裝500g
P450家族成員7A1(CYP7A1)英文名稱：CYP7A1 ELISA Kit腫瘤新因子1抗體包裝5g
P450家族成員3A4(CYP3A4)英文名稱：CYP3A4 ELISA Kit膽固25α7羥化抗體包裝1g
球形節(jié)桿菌Arthrobacter│globiformis 質(zhì)量規(guī)格：含量> 99%組織蛋白去乙酰化試劑盒抗狀腺球蛋白抗體
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品組織蛋白S試劑盒乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)國家參
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR組織蛋白L1試劑盒腸道病71型IgM抗體國家參考品
微核分析/遺傳毒性分析熒光染料朗比可假絲酵母 丁基基氯化銨同源盒蛋白HOXB13檢測試劑盒
四孢菇 1α-甲基雄烷-17β--3-酮/甲氫睪酮同源盒基因Six1檢測試劑盒
枯草芽孢桿 反式-3-己烯酸銅藍蛋白檢測試劑盒
梨黑星 3-丁炔-2-酮透明質(zhì)酸檢測試劑盒
新疆鹽地桿 1-BOC-2-甲透明質(zhì)酸合酶2檢測試劑盒
突孢毛殼 2-溴-6-氟甲苯透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白檢測試劑盒
黑曲霉變種 3-亞甲基環(huán)丁透明質(zhì)酸酶檢測試劑盒
堿線屬 1-Boc-3-羥甲基氮雜環(huán)丁烷突狀表面特異性C型凝集素-間黏附分子3結(jié)合非整合素分子檢測試劑盒
赤霉 9-芴酮-1-羧酸褪黑硫酸鹽檢測試劑盒
無環(huán)田頭菇 硫異煙褪黑素檢測試劑盒
Candidatus Rhizobium 2-羥基喹啉-4-甲酸脫-γ-羧基凝血酶原檢測試劑盒
大腸埃希 庚酸烯酯脫嘌呤;脫嘧啶核酸內(nèi)切酶;氧化還原因子1檢測試劑盒
Ag-16（蘑菇） 2,2',5,5'-四氯二苯脫嘌呤脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1檢測試劑盒
柿尾孢 葡乙脫氫表雄酮檢測試劑盒
地衣芽孢桿 3-氨基巴豆酸異酯脫氧胞苷激酶檢測試劑盒
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