詳細介紹
小鼠胰腺星狀原代細胞
英文名稱 | Mouse Pancreatic Stellate Cells | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
包裝 | 瓶裝 | 組織來源 | 胰腺組織 |
貨號 | GOY-01X0750 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、酶原、脂肪酶、酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應細胞,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達Desmin蛋白,活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標志物。靜息狀態(tài)PSC胞質內富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現,原代分離的細胞培養(yǎng)6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示,細胞接種24h仍然表達Desmin,48h后Desmin基本不再表達。培養(yǎng)48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數的增加,細胞表達alpha-SMA,而不再表達Desmin,說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養(yǎng)第6d大多數細胞激活,傳代后細胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,目前研究發(fā)現:胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,導致細胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀細胞經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich 中國倉鼠卵巢細胞;CHO 人胎兒細胞株;HFT-8810 [HFT8810] 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A CHL(倉鼠肺細胞) CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 小鼠誘導性多潛能干細胞 人原代下腔靜脈平滑肌細胞 大鼠原代肝外膽管上皮細胞
β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白 Recombinant Beta-Thromboglobulin (bTG)
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
CPM重組小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白 Protein
CD63 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
PRTFDC1重組人 PRTFDC1 蛋白 Protein
大鼠分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)試劑盒 ,英文名: SFRP5 ELISA Kit
Rat beta hydroxybyric acid (beta OHB) ELISA Kit 大鼠β羥(βOHB)試劑盒
RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 大鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforDPYSL2(humandihydropyrimidinase-like2)ELISAKit人二氫酶樣2
細胞葡萄糖-6-0酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法定量試劑盒50次
Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝細胞生長因子(HGF)試劑盒
勻漿制作或抽提 Homogenate production or exaction
(皮膚骨骼肌腸肌肉等難勻特殊樣品) (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)
超氧化物歧化酶(SOD)檢測 Superoxide dismase (SOD) detection
二(MDA)檢測 Malondialdehyde (MDA) detection
小鼠胰腺星狀原代細胞小鼠乙型肝核心抗體(HBcAb)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 人可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒
Humancytokeratin19,CK-19ELISAKit 人細胞角蛋白19(CK-19)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Human6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit人6同前列腺素F1a
飲料D-葡萄糖酸鹽比色法定量試劑盒20次
Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2ⅢELISAKit小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
HA重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rhBMP-2/BMP2 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 100ugrhBMP-2/BMP2 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2
CCNA1重組人 CCNA1 / Cyclin-A1 蛋白 Protein
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白
HAPLN1 Protein Human 重組人 HAPLN1 蛋白
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代,建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)
1、取出細胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3、細胞傳代:
1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細胞一次。
2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min 左右;顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入培養(yǎng)液終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。