小鼠腸黏膜上皮原代細(xì)胞公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：小鼠原代腸黏膜上皮細(xì)胞 BC-009(人癌細(xì)胞) MDA-MB-415 人癌細(xì)胞 1ml/T75 L-O2 人正常胎肝細(xì)胞 Jurkat, CloneE6-1 人 T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 人原代食管平滑肌細(xì)胞

小鼠腸黏膜上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門(mén)至的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過(guò)直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的第一道防線。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)  RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)     大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3  Pt K1細(xì)胞，長(zhǎng)鼻袋鼠腎細(xì)胞 人胰腺腺癌細(xì)胞,Panc 10.05細(xì)胞 小鼠原代皮膚成纖維細(xì)胞 大鼠原代腎集合管上皮細(xì)胞

髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)重組蛋白 Recombinant Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2)

HDAC8 Protein Human 重組人 HDAC8 / HDACL1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

KLK1重組人 KLK-1 / Kallikrein-1 蛋白 Protein

HA Protein H11N2 重組甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

SFRP4重組人 sFRP4 蛋白 Protein

大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)試劑盒 ，英文名： TNFRSF1B ELISA Kit

Mouse granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 小鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒

MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit人免疫抑制酸性蛋白

微型RNA(miRNA)目標(biāo)基因探測(cè)試劑盒5次

ELISAKitMIP-2大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白2

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠皮質(zhì)(mouse Coicosterone)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(mouse CTGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠腸黏膜上皮原代細(xì)胞小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

TBCB重組人 TBCB 蛋白 Protein

STAT5(signal transducers and activators of transduction5 0.5mgSTAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原

YWHAB重組人 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

FZD10 Protein Human 重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白

SLITRK1 Protein Human 重組人 SLITRK1 蛋白

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。