小鼠角膜上皮原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：小鼠原代角膜上皮細胞 MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞) HSAS3 人皮膚成纖維細胞 1ml/T75 HBMEC 人腦微血管內(nèi)皮細胞 3T3-L1 Swiss albion小鼠脂肪細胞 人原代胚肺成纖維細胞

小鼠角膜上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

小鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。其主要功能如下：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細胞層，外層即是上皮細胞；②角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng)；③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠角膜上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠角膜上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液   NEI-H209細胞，小細胞肺癌細胞 人前列腺癌細胞,22RV1細胞 人脈絡(luò)叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg  FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 小鼠原代口腔黏膜上皮細胞 小鼠原代肺動脈平滑肌細胞

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

大鼠載脂蛋白E(APOE)試劑盒 ，英文名： APOE ELISA Kit

Mouse phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒

MouseIerleukin9,IL-9ELISAKIT 小鼠白介素9(IL-9)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanfractalkine/CX3CL1ELISAKit人趨化因子

細胞/組織多聚賴載玻片制備試劑盒5次(50至100片)

ELISAKitMMP-9大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺素(T4)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒   96T/48T

小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒   96T/48T

小鼠角膜上皮原代細胞小鼠0酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human prostaglandin D syhase (PGDS) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶(PGDS)試劑盒

HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit 人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAdenovirusIgM,ADV-IgM試劑盒人腺病毒IgM(ADV-IgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法定量試劑盒20次

Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1,AFP-L1ELISAKit小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL17RA重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 Protein

GHR (growth hormone receptor 0.5mgGHR (growth hormone receptor) 生長激素受體(抗原)

CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標(biāo)簽)

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白