大鼠脊髓成纖維原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代脊髓成纖維細(xì)胞 PC-12(大鼠上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞) PG-BE1 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株 1ml/T75 MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 WML2 小白鼠肺成纖維樣細(xì)胞 大鼠原代腎成纖維細(xì)胞

大鼠脊髓成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

大鼠脊髓成纖維細(xì)胞分離自脊髓組織；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù)；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來(lái)處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對(duì)的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡(jiǎn)單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡(jiǎn)單反射活動(dòng)的低級(jí)中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對(duì)脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)；合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)；組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 Human  透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液)   1mL  大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106  NG108-15[108CC15]細(xì)胞，小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞 小鼠原代DC細(xì)胞 小鼠原代膀胱平滑肌細(xì)胞

5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin 0.5mg5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原

FES Protein Human 重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CFD重組小鼠 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 (aa 563-987, His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5A(W5A)試劑盒 ，英文名： W5A ELISA Kit

Mouse eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)試劑盒

MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHSP-20ELISAKit大鼠熱休克蛋白20

細(xì)胞MSK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-12/P40大鼠白介素12

尾加壓素 II(Human Urotensin II)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子 -1(VCAM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 A(VEGF-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

大鼠脊髓成纖維原代細(xì)胞小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble cell differeiation aigen 30 ligand (sCD30L) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒

HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD樣受體(NLR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-filaggrinaibody,AFA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

HumanVitaminD，VDELISAKit人(VD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

SCF (Stem Cell Factor 0.5mgSCF (Stem Cell Factor) 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗原

REG4重組人 REG4 / RELP / GISP 蛋白 Protein

CGA Protein Human 重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)