詳細(xì)介紹
大鼠精原干原代細(xì)胞
英文名稱 | Rat Spermatogonial Stem Cells | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
包裝 | 瓶裝 | 組織來源 | 睪丸組織 |
貨號(hào) | GOY-01X1203 | 細(xì)胞形態(tài) | 球形 |
培養(yǎng)信息:
包被條件
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠精原干細(xì)胞分離自睪丸組織;精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞,是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些優(yōu)勢使其成為動(dòng)物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項(xiàng)生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究,精子發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染,異體、異種移植技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動(dòng)睪丸內(nèi),精子發(fā)生時(shí)一個(gè)受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細(xì)胞(SSCs)一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級(jí)生精細(xì)胞直至后生成精子。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處,是哺乳動(dòng)物精子發(fā)生的原始細(xì)胞,也是動(dòng)物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動(dòng)物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠精原干細(xì)胞采用先機(jī)械吹打、后蛋白酶消化,結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠精原干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))
1、取出細(xì)胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3、細(xì)胞傳代:
1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞一次。
2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min 左右;顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入培養(yǎng)液終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。
HO-8910細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞,MCG803細(xì)胞 大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1 IL21R Others Human 人 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 Caco-2細(xì)胞,結(jié)腸腺癌細(xì)胞 鼠激酶缺陷細(xì)胞株 小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 人原代子宮內(nèi)膜成纖維細(xì)胞
HtrA絲肽酶4(HTRA4)重組蛋白 Recombinant HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4)
GRK6 Protein Human 重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IFNA4重組小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
PVR Protein Rat 重組大鼠 CD155 / PVR / NECL5 蛋白
TMEM27重組人 TMEM27 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠胃泌素抑制肽(GIP)試劑盒 ,英文名: GIP ELISA Kit
Mouse aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit 小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSF-1(HumanHeatShockFactor1)ELISAKit人熱休克因子1
細(xì)胞NADPH氧化酶活性比色法定量試劑盒20次(10樣本)
ELISAKitIFN-γ大鼠γ干擾素
兔脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit A-FABP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
兔血管緊張素II(rabbit Angiotensin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
兔骨成型蛋白-2(rabbit BMP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
大鼠精原干原代細(xì)胞小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人C(VC)試劑盒
Humancalmodulin,CAMELISAKit 人鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanchemerin試劑盒人chemerin試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米NK603品系試劑盒20次
Humanserineprotease,PRSSELISAKit人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FCGR2B重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein
MT-II(Melanotan II Acetate 1gMT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉諾坦II
IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
CYGB Protein Human 重組人 Cytoglobin / CYGB 蛋白
AKT3 Protein Mouse 重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標(biāo)簽)