大鼠口腔粘膜成纖維原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代口腔粘膜成纖維細(xì)胞 RAG(小鼠腺癌細(xì)胞) 2F7 人肺癌雜交細(xì)胞 1ml/T75 SKOV3/Taxol-25, 人癌耐藥細(xì)胞株 Human MouseM 小鼠肌肉細(xì)胞 大鼠原代乳腺成纖維細(xì)胞

大鼠口腔粘膜成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

大鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞分離自口腔粘膜組織；口腔（oral cavity）是消化道的起始部分。前借口裂與外界相通，后經(jīng)咽峽與咽相續(xù)?？谇粌?nèi)有牙、舌等器官?？谇坏那氨跒榇健?cè)壁為頰、頂為腭、口腔底為黏膜和肌等結(jié)構(gòu)。口腔借上、下牙弓分為前外側(cè)部的口腔前庭（oral vestibule）和后內(nèi)側(cè)部的固有口腔（oral cavity proper）；當(dāng)上、下頜牙咬合時(shí)，口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

HPX Others Mouse 小鼠 HPX / Hemopexin 人細(xì)胞裂解液   AGO2 Others Mouse 小鼠 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   GFRA3 Others Human 人 GFRA3 / GFR-alpha-3 小鼠骨髓巨噬細(xì)胞永生化細(xì)胞 小鼠原代呼吸道上皮細(xì)胞

β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)重組蛋白 Recombinant Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1)

GRK6 Protein Human 重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

MCAM重組小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 Protein

NRP1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BPHL重組人 BPHL 蛋白 Protein

大鼠胃泌素(GT)試劑盒 ，英文名： GT ELISA Kit

Mouse aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

MouselymphocytefactorELISAKit 小鼠淋巴細(xì)胞因子試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHSF1ELISAKit大鼠熱休克因子1

細(xì)胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次(10樣本)

ELISAKitGABA大鼠γ氨基

兔中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(rabbit NE)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子(rabbit NGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3(rabbit -3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

大鼠口腔粘膜成纖維原代細(xì)胞小鼠對(duì)基苯(PABA)ELISA 試劑盒

Human acidic fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)試劑盒

Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit 人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAquaporin4,AQP-4試劑盒人水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒

植物異檸檬酸脫氫酶(isociatedehydrogenase;IDH)電泳分析試劑盒5次

Humahyroxine，T4ELISAKit人甲狀腺素(T4)試劑盒

GFP重組水母 GFP 蛋白 Protein

TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 0.5mgTRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗原

AMICA1重組人 JAML / AMICA 蛋白 Protein

GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白

IL32 Protein Human 重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標(biāo)簽)

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。