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轉(zhuǎn)化細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)步驟

閱讀:736          發(fā)布時(shí)間:2018-3-9

轉(zhuǎn)化細(xì)胞材料:
6孔板
marker筆
直尺
20微升槍頭(滅菌)
無血清培養(yǎng)基
PBS
準(zhǔn)備:
所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))
流程:
1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2、在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過一夜能鋪滿。
3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不要傾斜。
4、轉(zhuǎn)化細(xì)胞用PBS洗細(xì)胞3次,去除劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時(shí)取樣,拍照。
150mg    Ethinyl Estradiol    57-63-6    炔雌醇標(biāo)準(zhǔn)品
150mg    Entacapone    130929-57-6    恩他卡朋標(biāo)準(zhǔn)品
150mg    Dioxybenzone    131-53-3    二羥苯宗標(biāo)準(zhǔn)品
150mg    Cortisone Acetate    1950/4/4    醋酸可的松標(biāo)準(zhǔn)品
150mg    Bromocriptine Mesylate    22260-51-1    甲磺酸溴隱亭標(biāo)準(zhǔn)品
150mg    Amifostine        氨磷汀標(biāo)準(zhǔn)品
150mg    Alfuzosin Hydrochloride    81403-68-1    鹽酸阿夫唑嗪標(biāo)準(zhǔn)品
150mg            甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品
150mg            甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品
15G    Rauwolfia Serpentina    8063-17-0     蛇根木標(biāo)準(zhǔn)品
15mg    Withanolide A    32911-62-9     睡茄交酯 A標(biāo)準(zhǔn)品
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