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目錄:愛必信(上海)生物科技有限公司>>生化試劑>>植物提取物>> abs60317核酸共轉(zhuǎn)染試劑

核酸共轉(zhuǎn)染試劑
  • 核酸共轉(zhuǎn)染試劑
參考價(jià) 2352
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
2352
≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 absin
  • 型號(hào) abs60317
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2025-03-26 14:52:53瀏覽次數(shù):1772評(píng)價(jià)

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CAS - 純度 -
分子量 - 分子式 -
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 0.5ml;1.0ml;1.5ml
貨號(hào) abs60317 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 專門用于將質(zhì)粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同轉(zhuǎn)染于同一細(xì)胞的試劑盒
核酸共轉(zhuǎn)染試劑盒是我們研發(fā)的專門用于將質(zhì)粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同轉(zhuǎn)染于同一細(xì)胞的試劑盒。它具有非常好的轉(zhuǎn)染性能,可將質(zhì)粒 DNA 和 siRNA 高效地共轉(zhuǎn)染于絕大多數(shù)貼壁細(xì)胞和原代細(xì)胞。

產(chǎn)品介紹:

核酸共轉(zhuǎn)染試劑盒是我們研發(fā)的專門用于將質(zhì)粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同轉(zhuǎn)染于同一細(xì)胞的試劑盒。它具有非常好的轉(zhuǎn)染性能,可將質(zhì)粒 DNA 和 siRNA 高效地共轉(zhuǎn)染于絕大多數(shù)貼壁細(xì)胞和原代細(xì)胞。在貼壁細(xì)胞中,質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染效率可高達(dá) 90%以上,siRNA 在質(zhì)粒轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染效率可高達(dá) 95%以上。其功能強(qiáng)大,不僅可高效轉(zhuǎn)染質(zhì)粒 DNA 和 siRNA,還可高效轉(zhuǎn)染 mRNA、mimics、反義核酸和各種小分子 DNA。與目前市場(chǎng)上常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不同,我們的共轉(zhuǎn)染試劑 采用生物可降解材料配制,對(duì)細(xì)胞的毒性很低,轉(zhuǎn)染后 24 小時(shí)細(xì)胞死亡率不到 10%。使用也非常方便,先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒 DNA 和 siRNA 混合,再將該轉(zhuǎn)染復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中,血清不影響其轉(zhuǎn)染效果,不必刻意添加或更換培養(yǎng)液,操作十分簡(jiǎn)便。

產(chǎn)品特點(diǎn):

1、強(qiáng)大的質(zhì)粒DNA與siRNA共轉(zhuǎn)染性能,可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞和原代細(xì)胞,質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率在貼壁細(xì)胞中可高達(dá)90%以上,siRNA在質(zhì)粒轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染效率高達(dá)95%以上;
2、共轉(zhuǎn)染功能強(qiáng)大,不僅可將質(zhì)粒DNA與siRNA共轉(zhuǎn)染于同一細(xì)胞,還可共轉(zhuǎn)染mRNA、mimics、反義核酸于同一細(xì)胞;
3、極低的細(xì)胞毒性:使用可降解生物材料,細(xì)胞毒性低,轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到10%,大大降低了因細(xì)胞毒性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。


操作步驟(以 24 孔板轉(zhuǎn)染為例):


A、 細(xì)胞接種:
1、轉(zhuǎn)染前一天對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接,每孔接種1.5×105個(gè)細(xì)胞,使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度為80-90%,且生長(zhǎng)良好(非常重要);
2、 最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基,以防轉(zhuǎn)染后孵育階段細(xì)胞密度太大、營養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡。


B、試劑A轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備(該步完成后應(yīng)立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染):
1、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl無血清培養(yǎng)基,再加入適量的轉(zhuǎn)染試劑,見附表。用移液器輕輕混勻,室溫靜置5分鐘。
2、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl無血清培養(yǎng)基,再加入適量的DNA,輕輕混勻,之后再加入適量的siRNA,見附表。用移液器再次輕輕 混勻,室溫靜置5分鐘。
3、將DNA-siRNA-培養(yǎng)基混合物滴加至試劑A-培養(yǎng)基混合物中,用移液器輕輕混勻,室溫靜置15~20分鐘,立即轉(zhuǎn)染。注意:試劑A-培養(yǎng)基混合物和DNA-siRNA-培養(yǎng)基混合物的混合次序非常重要,切勿顛倒。注意:離心管最好使用聚丙烯離心管。


C、轉(zhuǎn)染:
1、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中,邊加邊輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布。加完后,立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2、 培養(yǎng)24-48小時(shí)后觀察或進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。
3、試劑A在培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率,因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無血清或低血清培養(yǎng)基。


附表 1:不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件


培養(yǎng)皿96 孔板48 孔板24 孔板12 孔板6 孔板10cm 皿
培養(yǎng)基、試劑、核酸量無血清培養(yǎng)基(μl)2x102x252x502x1002x2002x1000
試劑A (μl)0.51.32.551050
1μg/μl plasmid (μl)0.160.40.81.63.216
siRNA (pmol)38153060300
培養(yǎng)基(ml)0.10.250.51210




儲(chǔ)存/保存方法:

-20°C 保存,有效期一年,使用前請(qǐng)輕輕混勻。


注意事項(xiàng):

1、剛開始轉(zhuǎn)染,請(qǐng)務(wù)必進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn),如24孔板質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,每孔質(zhì)粒用量0.8ug,siRNA用量15pmol,試劑A可選擇2.0ul、2.5ul、3.0ul進(jìn)行優(yōu)化?;蛘撸靠踪|(zhì)粒用量0.8ug,試劑A用量2.5ul,siRNA用量選擇10pmol、15pmol、20pmol、25pmol進(jìn)行優(yōu)化。
2、在制備DNA-siRNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí),應(yīng)避免體系中存在血清,因血清會(huì)干擾試劑A與DNA、siRNA形成復(fù)合物。培養(yǎng)體系中盡量不要添加抗生素,抗生素會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)胞死亡。


**溫馨提示:本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用,不支持臨床等研究

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