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在培養(yǎng)基開發(fā)過程中，除去培養(yǎng)基中的支原體是至關(guān)重要的，以確保細(xì)胞培養(yǎng)的健康和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。以下是一些常用的方法來清除培養(yǎng)基中的支原體：

抗生素治療：

使用抗生素是清除支原體的一種有效方法。常用的抗生素包括泰樂菌素、林可霉素、壯觀霉素、喹諾酮和四環(huán)素等。

德國MB Zell Shield®細(xì)胞支原體祛除試劑是一種即用型的復(fù)合抗生素，可用于保護(hù)細(xì)胞培養(yǎng)體系免受支原體等污染物的干擾。

在使用抗生素時，需要根據(jù)支原體類型和藥物敏感性選擇合適的藥物，并按照藥物說明書進(jìn)行操作。

熱處理：

將細(xì)胞培養(yǎng)基加熱至60℃以上可以有效地殺死支原體。然而，這種方法也會殺死細(xì)胞，因此只能在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后或不需要保持細(xì)胞活性的情況下使用。

過濾：

使用過濾器可以將細(xì)胞培養(yǎng)基中的支原體過濾掉。但這種方法可能無法清除支原體，且對于小分子的支原體可能效果不佳。

更換培養(yǎng)基：

一旦發(fā)現(xiàn)支原體污染，應(yīng)立即更換新的細(xì)胞培養(yǎng)基，以避免支原體繁殖并擴(kuò)散到整個培養(yǎng)體系中。

細(xì)胞株更換：

如果細(xì)胞株本身存在支原體污染，應(yīng)立即更換新的、未受污染的細(xì)胞株。

純化清洗：

對于珍貴的細(xì)胞，可以通過純化清洗的方法去除支原體。這通常涉及使用PBS或培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞數(shù)次，并通過離心力分離細(xì)胞和支原體。

預(yù)防措施：

在培養(yǎng)基開發(fā)和細(xì)胞培養(yǎng)過程中，采取預(yù)防措施是防止支原體污染的關(guān)鍵。這包括定期對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行消毒、對實(shí)驗(yàn)操作人員進(jìn)行培訓(xùn)、以及定期對培養(yǎng)箱和其他實(shí)驗(yàn)設(shè)備進(jìn)行維護(hù)和檢查。

綜上所述，清除培養(yǎng)基中的支原體需要綜合使用多種方法，并根據(jù)具體情況選擇合適的方法。同時，預(yù)防措施的采取也是至關(guān)重要的，以減少支原體污染的風(fēng)險。