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詳細介紹
簡便·快捷的總蛋白定量檢測試劑盒
蛋白質(zhì)快速測定試劑盒Wako II
本試劑盒可檢測樣品中的總蛋白。
現(xiàn)在，多數(shù)蛋白質(zhì)定量測定法會對試管、玻璃容器等造成污染。
本試劑盒使用以鄰苯三酚紅(PR)為色素的比色法作為基本原理進行開發(fā)的。顯色液操作簡單，幾乎不會對實驗器皿造成污染。
◆特點
● 一步定量
● 顯色液不需稀釋
● 反應(yīng)時間只需30分鐘
● 顯色器皿污染小
◆測定原理
鄰苯三酚紅(PR)與鉬酸結(jié)合，在470 nm處形成大吸收波長的紅色絡(luò)合物。該絡(luò)合物在酸性條件下與蛋白質(zhì)結(jié)合，使波長發(fā)生移位，同時使試液呈現(xiàn)出藍紫色。通過測定600nm附近的吸光度，對試劑中總蛋白的濃度進行測定。 |  |
◆操作概要【細胞法（cell method）】
1. 將50 μL樣品及3.0 mL顯色液充分混合*) |  |
試劑盒構(gòu)成
● 顯色液：310 mL×1支 ● BSA標準溶液(2 mg/mL)：5mL×1支 | 檢測范圍
● 細胞法(cell method)：62.5～2,000 μg/mL ● 微量滴定板法：125～2,000 μg/mL |
◆標準曲線例【細胞法】
共存物質(zhì)影響
共存物質(zhì)對樣品BSA（濃度500 μg/mL）的影響為無添加的吸光度的±10%以內(nèi)。
| 化合物 | 共存容許濃度 | 化合物 | 共存容許濃度 |
| 硫酸銨 | 0.8 mol/L | 2-巰基.乙醇 | 0.5 mol/L |
| 二硫蘇糖醇 | 0.5 mol/L | MES | 0.7 mol/L |
| 乙二胺四乙酸（EDTA） | 0.4 mol/L | MOPS | 0.2 mol/L |
乙二醇雙（2-氨基乙.醚）四乙酸（EGTA） | 0.04 mol/L | 氯化鈉 | 4 mol/L |
| 果糖 | 0.1 mg/mL | 氫氧化鈉 | 0.02 mol/L |
| 葡萄糖 | 0.1 mg/mL | 磷酸二氫鈉 | 1 mol/L |
| 谷胱甘肽（還原） | 0.5 mg/mL | 哌.嗪-1,4-二乙磺酸 | 0.5 mol/L |
| 甘油 | 50 v/v% | SDS *) | 0.01 w/v/% |
| 甘氨酸 | 0.1 mol/L | 疊氮.化鈉 | 0.2 w/v% |
| 鹽酸胍 | 0.1 mol/L | 蔗糖 | 40 w/v% |
| 4-羥乙基哌.嗪乙磺酸（HEPES） | 0.1 mol/L | 聚乙二醇辛基苯基醚 | 0.07 w/v% |
| 鹽酸 | 1 mol/L | 三羥甲基氨基甲烷 | 2 mol/L |
| 氯.化鉀 | 1 mol/L | 非離子活性劑20 | 0.1 mol/L |
| 六水氯化鎂(MgCl2?6H2O) | 1 mol/L | 尿素 | 6 mol/L |
*)本試劑盒易受SDS影響，此外校準曲線僅能夠在SDS 濃度0.01%，BSA濃度250～2,000μg/mL的條件下制作，請注意避免增加SDS的用量。
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 295-78401 | 蛋白質(zhì)快速測定試劑盒Wako II | 100次 |
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