大鼠細(xì)胞間粘附分子1試劑盒
大鼠細(xì)胞間粘附分子1試劑盒主要有 ELISA 試劑盒和化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒等類(lèi)型,以下以 ELISA 試劑盒為例介紹:
檢測(cè)原理
標(biāo)本類(lèi)型
操作步驟
進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣,設(shè)置不同濃度梯度。
加樣,分別設(shè)空白孔、待測(cè)樣品孔,加樣至酶標(biāo)板孔底部并輕輕混勻。
用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
再次 37℃溫育。
重復(fù)洗滌步驟。
每孔先加入顯色劑 A 50μl,再加入顯色劑 B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 15 分鐘。
每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)。
以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度。
注意事項(xiàng)
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,一次加樣時(shí)間控制在 5 分鐘內(nèi)。
標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高時(shí),需先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)乘以總稀釋倍數(shù)。
封板膜只限一次性使用。
底物請(qǐng)避光保存,嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作,試驗(yàn)結(jié)果以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。