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13906ES65RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 13906ES65 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):590更新時間:2022-06-01 11:37:30

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100t
貨號 13906ES65 應(yīng)用領(lǐng)域 制藥/生物制藥,綜合
本產(chǎn)品將LAMP可視光染料整合到buffer中,buffer中含dATP、dCTP、dGTP和dUTP等Bst II DNA Polymerase擴增必須的組分,同時包含pH 敏感指示劑
產(chǎn)品介紹

  • 產(chǎn)品信息

     

    產(chǎn)品名稱

    產(chǎn)品編號

    規(guī)格

    價格(元)

    RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

    13906ES65

    100 T

    1,795.00

    13906ES80

    1,000 T

    15,795.00

    13906ES92

    10,000 T

    135,795.00

     

    產(chǎn)品描述

     

    本產(chǎn)品將LAMP可視光染料整合到buffer中,buffer中含dATPdCTP、dGTP和dUTP等Bst II DNA Polymerase擴增必須的組分,同時包含pH 敏感指示劑,試劑盒含有無甘油Bst II DNA Polymerase、UDGase、RT enzyme等,可用于凍干反應(yīng)體系的配制;同時減少了加樣操作,降低操作誤差,在極大程度上抑制假陽性反應(yīng),提高檢測的準確度。本試劑盒具有較高的擴增效率和靈敏度,擴增結(jié)果可肉眼判斷,陽性反應(yīng)孔為橙黃色,陰性反應(yīng)為洋紅色,反差極大。

     

    產(chǎn)品組分

     

    組分編號

    組分名稱

    產(chǎn)品編號/規(guī)格

    13906ES65 (100 T)

    13906ES80 (1,00T)

    13906ES92 (10,000 T)

    13906-A

    2.5×pH Sensitive Reation Buffer

    mL

    10 mL

    100 mL

    13906-B

    無甘油RT酶Mix

    30 μL

    30μL

    3 mL

    13906-C

    無甘油Bst酶

    50 μL

    500 μL

    5 mL

     

    運輸保存方法

     

    Part I:組分13906-A【2.5×pH Sensitive Reation Buffer】干冰運輸,-20°C保存,有效期6個月。

    Prat II:組分13906-B\C【無甘油RT酶Mix\Bst酶】冰袋運輸,4°C保存,有效期6個月。

     

    注意事項

     

    1. 使用本試劑前請仔細閱讀說明書。

    2整個實驗,應(yīng)規(guī)范操作,包括反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣。

    3為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

     

    使用方法

     

    1. 待檢樣本準備

    核酸提取后樣本:直接作為模板,加入反應(yīng)體系中。

    煮沸法:臨床采集的拭子樣本直接放入水中,置于95°C水浴鍋或金屬浴中進行5 min的熱裂解,釋放核酸,混勻后即可作為模板加入反應(yīng)體系中。

    】:1)處理樣本的試劑不能使用強酸或強堿的核酸釋放劑,若必須使用,則樣本處理完后,需將樣本的pH調(diào)節(jié)至8.0。

    2)加入的樣本中,避免使用Tris-HCl等高濃度的緩沖體系,避免pH指示劑不能發(fā)生變色,影響實驗結(jié)果判讀。

    2. 反應(yīng)體系

    A組分從-20°C取出,溶解后顛倒混勻,瞬時離心確保所有液體落到管底。根據(jù)待檢測樣品量,配制如下體系(通常實驗需要設(shè)置陰性對照和陽性對照):

    組分

    單次反應(yīng)體積μL

    終濃度

    2.5×pH Sensitive Reation Buffer

    10

    1× 

    Bst酶

    0.5

    0.32 U/µL

    RT酶Mix

    0.3

    -

    10×Primers 2

    2.5

    1× 

    模板3

    10 ng-1 µg

    -

    加ddH2O至

    25

    -

    】:

    1)陰性對照推薦設(shè)置空白(不加模板)對照以及NTC(一般為水)對照。

    2)10×Primers16 µM FIP/BIP,2 µM F3/B3,4 µM Loop F/B each。

    3)模板加入量在1-8 µL內(nèi)調(diào)整推薦模板RNA溶解于DEPC水中。

    3. 加樣

    1如果反應(yīng)是在水浴鍋中進行,則每管加入20 μL礦物油(自備),以防止液體蒸發(fā)導(dǎo)致結(jié)果的誤差。如果反應(yīng)是在PCR儀中進行,不需要加礦物油(請開啟熱蓋)。

    2)為避免污染,建議用戶在超凈臺中配制組分,在其他房間的通風櫥中加入模板以免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

    3由于本試劑使用的是pH指示劑法,該試劑中的緩沖液能力較弱,試劑不可長期接觸空氣,否則會吸附空氣中的二氧化碳致使試劑變酸,導(dǎo)致試劑顏色變淺,影響實驗結(jié)果判讀。

    4. 反應(yīng)條件

    溫度

    時間

    作用

    25-37°C

    2-5 min

    降解含U模板

    60-65°C

    30 min

    恒溫擴增

    85°C

    5 min

    失活

    】:

    1)本試劑盒所用酶對溫度非常敏感,強烈建議使用PCR儀操作;如用水浴鍋,應(yīng)先加熱使其達到規(guī)定溫度后再反應(yīng)。溫差超過2°C,將導(dǎo)致擴增效率降低,使陽性反應(yīng)無法在說明書規(guī)定的時間內(nèi)洋紅色變成橙黃色。

    2)反應(yīng)溫度需要根據(jù)引物的Tm值進行調(diào)整。

    3)反應(yīng)時間依據(jù)模板濃度而定,低濃度模板可能需要60 min時間才能有比較明顯的反應(yīng)。

    5. 結(jié)果判斷

    反應(yīng)30 min后,立刻取出反應(yīng)管,待降溫至室溫后,置于光線良好的環(huán)境中觀察(建議以白紙作為背景)。如反應(yīng)液為洋紅色,則為陰性結(jié)果;如反應(yīng)液為橙黃色則為陽性結(jié)果。

    【注】:反應(yīng)的時間必須準確計時,超過說明書規(guī)定的反應(yīng)時間可能會出現(xiàn)假陽性。反應(yīng)管不可開蓋,否則會污染,影響后續(xù)實驗。

     

    HB220518





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