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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
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◆ iNtRON提供的LPS提取試劑盒是市場上的*個商品化的產品，排除傳統(tǒng)熱酚-水法的缺陷，使得科研工作者能夠快速方便的從細菌中提取LPS
產品介紹
脂多糖（LPS）提取試劑盒
產品信息：（現(xiàn)貨供應）
產地 | 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 | *（元） |
iNtRON | 17141 | LPS extraction kit | 100次 | 1500.00 |
試劑盒組成
組分 | 名稱 | 規(guī)格 | 保存方法 |
1 | Lysis Buffer | 1x 100 ml | 2~8℃ |
2 | Purification Buffer | 1x 80ml | 2~8℃ |
LPS背景描述：
◆ 脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的主要成分，結構很復雜、熱穩(wěn)定性*（在250℃下干熱滅菌2h才*滅活）。受LPS發(fā)現(xiàn)的歷史原因，如今LPS的概念幾乎等同于內毒素（endotoxin）。LPS由多糖鏈和脂質A組成，不同細菌間的多糖鏈是高度變化的，決定細菌的血清型；而脂質A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級聯(lián)反應和機體的毒性病理生理活動，包括釋放內毒素引起感染性休克從而導致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。
◆ 正是LPS與機體免疫機能的密切關系，生命科學研究常常提取LPS進行相關的研究，如闡明LPS的結構，代謝，免疫學，生理學，毒性，生物合成途徑；誘導生長促進因子如白介素的合成與分泌；誘導疾病研究的動物模型如炎癥反應，急性肺損傷，
產品描述：
◆ 常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. （1965）使用的熱酚-水法（hot phenol-water method），主要優(yōu)勢在于高產量，但是提取步驟繁瑣，費時，以及常受蛋白質和核酸的污染，純度低等缺點也常困擾科研工作者。
◆ iNtRON提供的LPS提取試劑盒是市場上的*個商品化的產品，排除傳統(tǒng)熱酚-水法的缺陷，使得科研工作者能夠快速方便的從細菌中提取LPS。
產品優(yōu)勢：
∷適用性廣，能從所有G-菌中提取LPS（見Fig. 2）；
∷操作時間短（包括裂解在內，60min內即可完成）；操作簡單方便；
∷少量細菌即可獲得足夠的LPS；LPS產量與細菌培養(yǎng)物成正比，一般使用3~5ml培養(yǎng)物LPS產量zui高；細菌*培養(yǎng)體積1~2ml（OD600=0.8-1.2）
∷LPS產率高，且重復性好（見Fig.1）；
∷提取LPS下游應用廣，包括直接用于免疫刺激；
操作步驟：
1）室溫離心收獲細菌細胞，13，000rpm，30sec。
2）加入1ml裂解緩沖液（Lysis Buffer），劇烈渦旋混勻。
3）加入200μl氯仿，劇烈渦旋混勻10-20 sec，室溫孵育5min。
4）4℃，13,000rpm離心10min，轉移400μl上清到新1.5ml離心管中。
5）加入800μl純化裂解液（Purification Buffer），并混勻。-20℃孵育10min。
6）4℃，13,000rpm離心15min。
7）用1ml 70%EtOH洗滌LPS顆粒，并*干燥。
8）在LPS中加入70μl Tris-HCL（10mM，pH8.0），并超聲。
應用文獻：
1）YanH.L, et al.DNA Sequencing and Identification of Serogroup-Specific Genes in the Escherichia coli O118 O Antigen Gene Cluster and Demonstration of Antigenic Diversity But Only Minor Variation in DNA Sequence of the O Antigen Clusters of E. coli O118 and O151. Foodborne Pathogens and Disease. 5（4）: 449-457（2008）.
2） HA Shui, et al. LPS-evoked IL-18 expression in mesangial cells plays a role in accelerating lupus nephritis. Rheumatology 46:1277–1284（2007）.
3） R Bucki, et al..Release of the antimicrobial peptide LL-37 from DNA/F-actin bundles in cystic fibrosis sputum. European Respiratory Journal 29:624-632 （2007）.
4） BH.Kim, et al. Effect of retinoids on LPS-induced COX-2 expression and COX-2 associated PGE2 release from mouse peritoneal macrophages and TNF-α release from rat peripheral blood mononuclear cells. Toxicology Letters 150（2）:191-201（2004）.
5） Anat Lerner, et al. The Azospirillum brasilense Sp7 noeJ and noeL genes are involved in extracellular polysaccharide biosynthesis. Microbiology 155: 4058–4068（2009）.
6） Chitrita DebRoy, et al. Multiplex Polymerase Chain Reaction Assay for Detection of Nonserotypable Shiga Toxin–Producing Escherichia coli Strains of Serogroup O147. Foodborne Pathogens and Disease 7（11）: 1407-1414（2010）.
