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關(guān)鍵詞:原代細(xì)胞、轉(zhuǎn)染、Primary Cells、電轉(zhuǎn)、Lonza/Amaxa、qcbio、4D-Nucleofector
產(chǎn)品信息
產(chǎn)地 | 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 報價/元 | */元 | 貨期 |
Lonza/Amaxa | V4XP-3024 | P3 Primary Cell 4D X Kit L | 24 Test | 6400 | 4120 | 現(xiàn)貨 |
P3 Primary Cell 4D X Kit L
——用于原核細(xì)胞轉(zhuǎn)染
產(chǎn)品介紹
Lonza公司目前有5種不同的原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染液（Nucleofector? Solutions）可適用于4D-Nucleofector系統(tǒng)，分別為P1, P2, P3, P4和P5。
P3 Primary Cell 4D X Kit L適用于4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，該系統(tǒng)采用導(dǎo)電性聚合物，取代了金屬鋁離子，保證轉(zhuǎn)染的同時獲得高的細(xì)胞存活率。由于哺乳動物神經(jīng)細(xì)胞缺乏細(xì)胞特異的Amaxa?優(yōu)化操作手冊，可使用P3 Primary Cell Kits配有細(xì)胞特異的Protocol，可用來優(yōu)化哺乳動物神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染條件。可用來轉(zhuǎn)染不同哺乳動物的多種神經(jīng)細(xì)胞。
試劑盒組分(100μl體系，24 Test)
- 細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)染液(2.25 ml)
- 添加劑(0.5 ml)
- pmaxGFP陽性質(zhì)粒(50μg)
- 單孔電轉(zhuǎn)杯（100μl）(24個)
Nucleofector 細(xì)胞核轉(zhuǎn)染技術(shù)操作步驟（詳細(xì)Protocol請登錄Lonza*查閱）
整個操作過程只需四步，非常簡單、。
第1步：處理細(xì)胞，計數(shù)
第2步：混合DNA、轉(zhuǎn)染液，重懸細(xì)胞，加入轉(zhuǎn)染杯
第3步：將轉(zhuǎn)染杯放入轉(zhuǎn)染儀，按鍵選擇相應(yīng)程序，按"start"鍵開始轉(zhuǎn)染，10秒鐘左右
第4步：取出細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。
延伸閱讀——原位轉(zhuǎn)染
“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)"突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細(xì)胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷，實現(xiàn)了貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。原位轉(zhuǎn)染技術(shù)實現(xiàn)了生理狀態(tài)下（貼壁培養(yǎng)過程中）的轉(zhuǎn)染，如Basic Neuron Nucleofector? AD 轉(zhuǎn)染試劑盒。
2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條，推出了*個原位核轉(zhuǎn)染試劑盒；
2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。
2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進行原位核轉(zhuǎn)染
優(yōu)勢：
– 可在神經(jīng)元貼壁生長的任何階段進行原位核轉(zhuǎn)染或多次進行原位核轉(zhuǎn)染
– 原位轉(zhuǎn)染前、中、后，神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長的生理狀態(tài)
– *轉(zhuǎn)染效率zui高可達(dá)70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法
– 整個過程維持了細(xì)胞功能
– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析
