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ELISA實驗常用規(guī)則和通用步驟是什么？
閱讀：1434 發(fā)布時間：2013-8-2ELISA實驗常用的規(guī)則是什么?
ELISA是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。它是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術。以下是對ELISA實驗的通用步驟的簡單說明。
ELISA實驗通用步驟：
（1）、要保證移液槍的性，偏差不能超過2%。可用水和電子天平進行判定。如果有專業(yè)人員進行糾正更好。
（2）、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。提取不一樣的液體后，要更換槍頭。即使是提取標準品時也一樣。
要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復到室溫，以使效果更安穩(wěn)。
（3）、實驗時，要使底物避光儲存。
（4）、用槍提取液體時速度不能太快，避免生成氣泡而使提取量不。
（5）、提取液體時，要用量程和需要量相近的槍去吸，減小偏差數(shù)值。
（6）、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
（7）、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕搖晃30秒，是液體緩和均勻。也可以用酶標儀的晃動功用。
（8）、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，避免水分的蒸發(fā)。
（9）、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
（10）、洗液不夠時，可用蒸餾水自行制作PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長時間保存。
（11）、底物是光敏感的，需要在臨用前現(xiàn)配。
（12）、檢測前，要翻開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
（13）、底物有一定的毒性，中止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
（14）、待檢樣品要澄清，否則會影響效果的性。
（15）、溫浴時間應遵循試劑盒規(guī)定。
（16）、應盡量做雙孔實驗，這樣才華保證數(shù)據(jù)的性。
（17）、對效果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。