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新型細(xì)菌莢膜染色法使用說明書

閱讀:2351          發(fā)布時(shí)間:2013-6-18
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                          新型細(xì)菌莢膜染色法

                              使用說明書

  莢膜是某些細(xì)菌的一種特殊構(gòu)造,具有抗吞噬與細(xì)菌致病作用密切相關(guān)。莢膜的形成與環(huán)境條件有密切關(guān)系,一般在動(dòng)物體內(nèi)和含大量血清和糖的培養(yǎng)基中容易形成,而在普通培養(yǎng)基上易消失。細(xì)菌莢膜染色是細(xì)菌鑒定中很重要的一種技術(shù)。目前常用的染色法有Hiss,MuirBaily以及改良染色法等等,但這些方法分別存在染色效果不很理想,操作復(fù)雜,染液不穩(wěn)定,莢膜不典型等缺點(diǎn),我們參考有關(guān)文獻(xiàn),提供了一種新的細(xì)菌莢膜染色法,所染的莢膜厚大,清晰易見,結(jié)果穩(wěn)定,效果甚佳。

試劑盒組成】:

組成

染液名稱

規(guī)格

A

石炭酸復(fù)紅染液

10ml

B

特殊媒染劑

10ml

C

堿性美蘭液

10ml

染色方法】

  制作有莢膜的細(xì)菌涂片,干后加熱固定。用A液染3 min(染液提前30 min37℃水浴箱預(yù)熱,用水沖去染液,傾去玻片上余水,再用B液染3 min,水沖洗,后用C液染1 min,水沖洗,干燥后油鏡觀察。

【染色結(jié)果】:

  菌體呈紫紅色,莢膜呈淺藍(lán)色,背景無色。產(chǎn)氣莢膜桿菌染色結(jié)果與肺炎鏈球菌結(jié)果相似。金黃色葡萄球菌菌體周圍未見莢膜。

【注意】:

  A液染時(shí)若不加熱,菌體容易著色而莢膜不易著色,因此莢膜在菌體周圍表現(xiàn)為一圈白色的光環(huán),與假莢膜不易區(qū)分。若加熱的溫度和時(shí)間掌握不好,容易使莢膜破壞和皺褶,在菌體周圍出現(xiàn)殘缺及模糊不清的環(huán)圈,稱為假莢膜。采用染色前30 min將染液放37℃水箱預(yù)熱后再行染色的方法,由于溫度適中,沒有破壞莢膜結(jié)構(gòu),無假莢膜現(xiàn)象。

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