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詳細(xì)介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321296 |
商品介紹：
測定意義土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機(jī)物的降解活性，可以作為土壤微生物的降解性能指標(biāo)。測定原理氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈現(xiàn)紅色，在波長485nm處有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm測定其吸光值，即得土壤脫氫酶活性。自備實(shí)驗(yàn)儀器及用品篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī)、漏斗，濾紙、可見分光光度計(jì)、玻璃比色皿，冰、蒸餾水、丙酮（不允許快遞，請用戶自備）。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
2-芐基咪唑啉英文名： 2,7-Di-tert-butylfluorene原鈣粘蛋白γA5抗體包裝5g
2-代-5'-乙基酰基腺苷英文名： 9-Fluorenone原鈣粘蛋白γA7抗體包裝1g
2-代腺苷英文名： 9-Fluorenol原鈣粘蛋白γA8抗體包裝5g
2-代腺苷2',3'-縮英文名： 2-Fluorenecarboxaldehyde原鈣粘蛋白γA9抗體包裝1g
2-疊氮-1,3-二-o-三基乙酰-D-赤-鞘英文名： 2-Hydroxy-9-fluorenone原鈣粘蛋白γA11抗體包裝5MG
2-疊氮-1-三基乙酰-D-赤-鞘英文名： 2-Nitrofluorene原鈣粘蛋白γA12抗體包裝1mg
2-疊氮腺苷英文名： 9,9'-Spirobi[9H-fluorene]原鈣粘蛋白β12抗體包裝100g
2--4-去比魯英文名： 2-Aminoanthracene原鈣粘蛋白β3抗體包裝25g
2-腺英文名： 1-Aminoanthracene原鈣粘蛋白γB1抗體包裝5g
2-基-Δ1-醋地孕 (醋地孕雜質(zhì))英文名： 9-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γB2抗體包裝100g
2-基硫代二磷腺苷英文名： 1-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γB4抗體包裝25g
2-基硫代二磷腺苷英文名： 2-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γB6抗體包裝500g
2-酰-3,17β-O-二(氧基)雌二英文名： 9,10-Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene原鈣粘蛋白γC3抗體包裝100g
2-肼基腺苷英文名： 9-Bromoanthracene原鈣粘蛋白γC4抗體包裝25g
2-腺苷 5'-單磷雙三乙鹽英文名： 2-Bromo-9,10-diphenylanthracene磷蛋白聚糖PTPRZ抗體包裝5g
加州鏈霉菌Streptomyces│californicus 質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR谷谷草轉(zhuǎn)2，線粒體試劑盒乙酰;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
鏈格孢菌Alternaria│alternata (Fr.) Keissl. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷-半胱連接調(diào)節(jié)亞基試劑盒蔗糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR谷[NMDA]受體亞基ε-2試劑盒維生D3;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
土壤脫氫酶(SDHA)測試盒50管/48樣微紅帚霉 山梨酸鈣鈣調(diào)依賴性蛋白激2Elisa
加鏈霉 1,3-二(2,4-二氨基苯氧基)烷鹽酸鹽5-羥色受體1AElisa
隆德假單胞 2,4-二-6,7-二氫噻吩[3,2-D]嘧啶胰蛋白Elisa
大腸埃希氏 (2R,4R)-4-甲基-2-甲酸15S-羥化二十碳四烯酸Elisa
MG1655 ΔendA ΔrecA (DE3) 3-甲基-8-喹啉磺酰15-羥化二十碳四烯酸Elisa
茯苓 2-氨基-5-三氟鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白IgG抗體Elisa
耐熱裸囊 7-靛紅布魯氏抗體Elisa
釀酒酵母 3,3-二苯基酸乙酯嗜酸性選擇性趨化因子2Elisa
乳酸計(jì)數(shù)模擬乳粉質(zhì)控樣品 3,4-二氨基苯磺酸骨成型蛋白1Elisa
大腸埃希 4-(4-甲基哌-1-基)苯酸頻哪酯脯羥化Elisa
局限青霉 (R)-(+)-2-酸甲型肝炎病IgG抗體Elisa
短波單胞屬 4-溴甲基-2-甲氧基甲酯顆粒KElisa
小單孢 扎托心肌型肌酸激同工MBElisa
谷棒桿 4-羥基-2-氨基苯并噻唑病抗原Elisa
里亞氏須腹 N,N'-二[2-(二苯基膦基)亞芐基]乙二脯Elisa
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